益气活血药干预血管老化的研究及思考课件.pptVIP

研究背景 400年前，近代临床医学之父、英国著名内科医师奚丁汉说过一句话：“一个人的动脉有多老，他就有多老。” 血管衰老的表现及病理变化 血管老化（vascular aging）表现为血管僵硬度增加、顺应性降低和动脉管壁增厚 血管衰老是人体衰老的关键始发因素,主要体现在血管壁结构和功能的异常 动脉年龄对于维系心脏健康至关重要，而动脉年龄又取决于血管内膜，美国匹兹堡大学谢迪赛德医学中心的首席心脏病专家布莱恩·多诺霍博士说，血管内膜是血管的‘健康卫士’ 血管壁结构 血管老化的分子生物学基础 检测血管结构和功能的指标 中医药延缓衰老研究 研究目的和意义 构建血管老化的动物和细胞模型 探索血管老化的临床特征和分子生物学标志 揭示血管衰老的细胞和分子机制 探讨益气活血中药延缓血管老化的效应和机制 课题组前期工作 构建血管细胞衰老模型：血管内皮细胞(VEC) 血管平滑肌细胞(SMC) 血管外膜成纤维细胞(VAF) 复制自然衰老大鼠/小鼠模型:心脏及血管 临床研究：衰老的高血压病患者 前期工作 研究结果(一) 人参三七川芎提取物可延缓AngⅡ诱导和复制性内皮细胞衰老,可由AT1R蛋白水平下调NADPH氧化酶p47phox的表达，使VEC产生活性氧减少，进而延缓细胞的衰老 中药提取物可延缓衰老小鼠血管老化的进程，改善小鼠主动脉形态学衰老变化，通过降低血管组织中活性氧的生成，减少AGEs的产生，抑制MMP-2的活性，调节MMP-2/TIMP-2的平衡，达到降低衰老小鼠血管僵硬度、减少血管重构、延缓小鼠血管老化的发生 SA-β-gal染色细胞衰老测定  内皮细胞周期 内皮细胞内ROS含量 细胞p47phox、AT1R、AT2R蛋白表达 与VitE组比较，8代衰老组p47phox，AT1R，AT2R表达明显上调；与8代衰老组比较，中药高、低剂量组与Vit E组p47phox表达明显下调，AT1R，AT2R表达明显下调；与Vit E组比较，中药高、低剂量组p47phox，AT2R表达上调，AT1R表达仅有上调趋势，无明显差异 研究结果(二) 增龄与高血压对大鼠主动脉病理形态的影响 益气活血中药延缓老年大鼠SMC衰老的机制研究 益气活血中药延缓SHR大鼠SMC衰老的机制研究 增龄与高血压对大鼠主动脉病理形态影响的实验研究 增龄与高血压对大鼠主动脉病理形态影响 老年大鼠和SHR大鼠的主动脉结构改变相似，均表现为内膜增厚，中膜显著增厚，平滑肌细胞向内膜迁移，细胞增大； 老年大鼠和SHR大鼠的主动脉平滑肌、胶原相对含量显著升高； 提示增龄导致血管结构改变呈现血管老化的特征，而高血压能诱发、促进血管老化的发生。 青年组和老年组大鼠不同代数VSMC生长曲线 益气活血药延缓老年大鼠VSMC衰老的研究 SA-β-gal细胞衰老测定 益气活血药延缓老年大鼠VSMC衰老的研究 MMP-9免疫细胞化学染色表达(×400) 益气活血药延缓老年大鼠VSMC衰老的研究 MLCK细胞免疫荧光染色 益气活血药延缓老年大鼠VSMC衰老的研究 中药对VSMC p16、cyclinD1、CDK4、Rb和PPARγmRNA表达的影响 益气活血药延缓老年大鼠VSMC衰老的研究 各组P16、 Cscyclin D1、CDK4、Rb和PARγmRNA表达 中药延缓老年/SHR大鼠VSMC衰老的机制研究 小结 与青年大鼠相比，老年大鼠和SHR大鼠的VSMC增殖能力明显增强；且VSMC衰老细胞增多，中药可延缓老年及SHR大鼠VSMC的衰老 中药提取物能降低老年和SHR大鼠VSMC中的MMP-9、TGFβ1表达，升高MLCK的表达，以抑制VSMC增殖、迁移，增强VSMC的收缩能力，减少增龄或高血压导致的血管结构改变，提高血管弹性，延缓血管老化； 中药提取物可能通过增加PPARγ的表达，激活p16-CyclinD/CDK-RB途径以抑制老年/ SHR大鼠VSMC的增殖 小结 健康增龄所致的生理性血管老化和高血压引起的病理性血管老化在一定程度上具有相似性，均表现为动脉管壁增厚，提示增龄能导致大鼠主动脉老化，而高血压能诱发、促进血管老化的发生 自然衰老的大鼠和SHR大鼠主动脉SMC增殖能力增强、 SA-β-gal染色阳性表达增强，中药可降低二者VSMC的SA-β-gal染色阳性率，通过作用于TGFβ1、PPARγ等细胞因子和p16-CyclinD/CDK-RB途径抑制VSMC增殖、迁移，增强VSMC的收缩能力