流感病毒细胞分离培养课件.ppt

流感病毒细胞分离培养 一、组织培养概况 （一）组织培养定义 组织或细胞培养是指从机体中取出组织或细胞，模拟机体内的生理条件在体外进行培养，使之生存和生长。 （二）、组织培养的原理 组织培养主要是为病毒易感的组织细胞提供一个良好的生存环境，使细胞对环境产生适应性，获得生长繁殖的能力。 病毒在敏感细胞中繁殖，常可引起细胞代谢等方面的变化，可出现细胞病变并释放病毒到维持液中，这种情况可用细胞病变、色变法及检测维持液中病毒抗原的方法，判定病毒的存在及滴度。 有些病毒不引起细胞病变，有些在核内繁殖不易释放到维持液中，前者可用干扰的方法及免疫荧光的方法来检测病毒，后者常采用冻融破坏细胞获得病毒后检测。 （三）、组织培养所需的材料和条件 1、组织或细胞来源： 人、猴、啮齿类、禽的胚胎、脏器以及昆虫等为组织培养常见的组织来源。用于病毒培养的往往是病毒的自然宿主细胞。如人类病毒用人和猴组织较敏感，但有些病毒用其他宿主细胞亦很敏感，如乙脑病毒对白纹伊蚊细胞系C6/36较人的细胞更为敏感。流感病毒对狗肾传代细胞（Madin darby canine kidney,MDCK）亦很敏感 。 2、单细胞的制备（略） 3．细胞培养的基本条件： （1）细胞接种数：细胞量越大繁殖的速