第4、5、6、7章 蛋白质的结构、功能与分离纯化--0914.ppt

第四章 蛋白质的共价结构 一、? 蛋白质通论 （一）蛋白质的化学组成和分类 1、?? 元素组成 碳 50% 氢7% 氧23% 氮16% 硫 0-3% 微量的磷、铁、铜、碘、锌、钼 凯氏定氮：粗蛋白质含量=蛋白氮×6.25 2、?? 氨基酸组成 蛋白质是由20种L-型α氨基酸组成的长链分子 3、?? 分类 （1） 按组成： 单纯蛋白质：只含氨基酸成分；可以根据其物理性质进行分类 缀合蛋白质：氨基酸 + 辅基（配体）；可以按其非氨基酸成分进行分类 （2）按生物学功能： 酶、调节蛋白、转运蛋白、贮存蛋白、收缩和游动蛋白、结构蛋白、支架蛋白、保护和开发蛋白、异常蛋白。 （二）? 蛋白质分子的形状和大小 1 形状 纤维状蛋白质：具有比较简单 球状蛋白质 膜蛋白质 2 大小 少于50个氨基酸的低分子量多聚物称为肽，寡肽或生物活性肽，有时也称多肽。 多于50个氨基酸的称为蛋白质。 蛋白质分子量 = 氨基酸数目*110 （三）? 蛋白质的构象和蛋白质结构的组织层次 蛋白质都有自己特有的天然空间结构，称为构象。 ? 一级结构：氨基酸顺序 二级结构：α螺旋、β折叠、β转角，无规卷曲 三级结构： 整个肽链（亚基）的形状； 四级结构 ：亚基之间的聚集形式。 （四）蛋白质功能的多样性 催化—酶，生物催化剂 调节—激素蛋白类，调节体内的物质代谢过程或参与基因表达的调控 转运—运输蛋白类，通过血流或膜通道转运特定的物质 贮存—能贮存氨基酸等，作为机体的营养物，在需要时提供各种元素 运动—使细胞或生物体发生运动 结构成分—具有强大的抗拉作用，对机体起支持作用 支架作用—在细胞应答激素和生长因子的途径中起作用 防御和进攻—在细胞防御、保护和开发方面的主动作用 异常功能 二 肽 肽 (peptides)是由氨基酸通过肽键连接起来的一类有机物。根据其所含氨基酸残基的数量，有小肽和多肽之分。 小肽一般是指不到10个氨基酸所组成的肽，多肽一般是指10—50个氨基酸所组成的肽。 （一） 肽键与肽链 肽键：一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基之间失水形成的酰胺键。 肽键的特性 肽键的结构特点： 酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基之间形成共振杂化体。 肽键具有部分双键性质，不能自由旋转。 肽键具有平面性，组成肽键的4个原子和2个Cα几乎处在同一平面内（酰氨平面）。 肽键亚氨基在pH014内不解离。 肽链中的肽键一般是反式构型，而Pro的肽键可能出现顺、反两种构型． 肽 链 由两个氨基酸组成的肽称为二肽，由多个氨基酸组成的肽则称为多肽。 组成肽链的氨基酸单元称为氨基酸残基。 肽链中AA的排列顺序和命名 在多肽链中，氨基酸残基按一定的顺序排列，这种排列顺序称为氨基酸顺序。 通常在多肽链的一端含有一个游离的?-氨基，称为氨基端或N-端；在另一端含有一个游离的?-羧基，称为羧基端或C-端。 氨基酸的顺序是从N端的氨基酸残基开始，以C端氨基酸残基为终点的排列顺序。如上述五肽可表示为： Ser-Val-Tyr-Asp-Gln （二）肽的物理和化学性质 旋光性：一般短肽的旋光度等于其各个氨基酸的旋光度的总和。 肽的酸碱性质 短肽在晶体和水溶液中也是以偶极离子形式存在。 肽的酸碱性质主要取决于Ｎ端α－ＮＨ２和Ｃ端α－COOH以及侧链Ｒ上可解离的基团。 在长肽或蛋白质中，可解离的基团主要是侧链基团。 4） 原则：当溶液pH大于解离侧链的值，占优 势的离子形式是该侧链的共轭碱，当溶液pH小于解离侧链的值，占优势的离子形式是该侧链的共轭酸。 3. 肽的化学反应：肽的α-羧基，α-氨基和侧链R基上的活性基团都能发生与游离氨基酸相似的反应，如茚三酮反应、Sanger反应、DNS反应和Edman反应；还可发生双缩脲反应（含有两个或两个以上肽键的化合物与CuSO4碱性溶液发生反应生成紫红色或蓝紫色的复合物。氨基酸无该反应）。 （三）天然存在的活性肽 一些小肽在动物体内主要用于合成蛋白质，作为体蛋白的结构组分， 因而称之为结构肽(structural peptieds)。 另有一些肽类物质，在体内并非用于合成蛋白质，而是独立发挥其特定的生物学功能，一般称之为生物活性肽 （bioactive peptides），简称活性肽； 也称功能肽（functional peptides)。 已为人们广泛熟悉的表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF)、成纤维细胞生长因子（ fibroblast growth factor, FGF）、类胰岛素生长因子（insulin-like growth factor, IGF)均为典型的生物活性肽。 1 谷胱甘肽(G