第三篇 器官培养.pptVIP

第三章 器官培养 植物组织培养 第3章 器官培养 本章主要内容 根的培养 茎尖的培养 叶的培养 花器官的培养 果实的培养 第3章 器官培养 (1)一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选择； (2)掌握茎尖培养的种类和操作步骤； (3)掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的调整； (4)掌握离体叶片的培养步骤； (5)一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。 第3章 器官培养 本章教学目的与要求 器官培养的定义： 第3章 器官培养 研究器官的功能、分化、形态建成； 快速繁殖； 获得脱毒苗 种质保藏等 指植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等 培养目的： 第一节 根的培养 一. 根培养的意义: 1) 是进行根系生理研究的最优良实验体系; 2) 是研究器官分化、形态建成的良好体系； 3）可建立快速生长的根无性系。 第3章 器官培养 二. 离体根培养特点： 根系生长快，代谢强，变异小，加上无菌，不受微生物干扰，可根据研究需要，改变培养的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化。 一、离体根的培养方法： 1、培养无菌苗 2、切取1.0cm的根尖 3、接种在White培养基或1/2MS培养基中暗培养 4、一周后，取侧根扩大培养，可得到离体根的无性系 第一节 根的培养 培养材料：在离体根培养中，自然条件下生长在土壤中的根要解决消毒问题，是非常困难的，常用无菌苗的根作为培养材料。 二、培养基： 无机离子较低的White培养基 或者2/3或1/2的MS、B5培养基 三、影响离体根生长的因素 第一节 根的培养 影响因素 1. 植物种类 2. 培养基　多为浓度低的White培养基，许多植物在1/2MS培养基上能生根。糖的使用浓度应稍低，如玫瑰生根蔗糖为2%。 3. 生长物质 培养基中添加适宜浓度的生长素有利于根的形成和生长，常用生长素为IAA、NAA、IBA，浓度范围一般为0.1-1.0mg/L。 4. pH 根的培养适宜的pH范围为5.0～6.0， 5. 光照 大多数人认为，黑暗有利于根的形成。 试管苗的生根一般无需考虑光照的影响，有时加一点活性炭可减弱光照，对植物的生根比较有利。 6. 温度 生根温度一般控制在16～25℃。 第二节 茎尖的培养 一、类型及意义 1、类型 微茎尖(茎尖分生组织)培养 指带有1～2个叶原基的生长锥，其长度不超过0.5mm。 目的是获得无病毒植株 普通茎尖培养： 指对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养. 目的是快速繁殖。 技术简单,操作方便,易成活和分化,成苗时间短。 第二节 茎尖的培养 2、茎尖培养的意义 无性系快速繁殖； 培养无病毒苗，品种改良； 理论基础研究。 第二节 茎尖的培养 蝴蝶兰腋芽萌发 二、茎尖培养的一般方法 (一) 制备外植体取1-2cm的枝条顶梢，去小叶---消毒---解剖镜下用解剖刀除去幼叶和叶原基，露出生长点，切下0.1-0.2mm长的茎尖(含1-2个叶原基) (二)培养基：一般为MS (三)培养方法： 1、固体培养法：试管培养 第二节 茎尖的培养 2、纸桥培养法 含义：用酒杯状的滤纸代替琼脂，使杯底朝上塞入试管中，与液体培养基接触，将离体茎尖置于滤纸上方进行培养。 优点：培养基是液体培养基，营养物质能通过滤纸均衡而持久地供给外植体，有利于外植体的健康成长 ； 缺点：操作工艺复杂 。 第二节 茎尖的培养 三、茎尖分生组织培养与脱毒 见第八章 植物脱毒技术 四、普通茎尖培养与繁殖技术 概念：快速繁殖(微繁殖):用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。 特点： 繁殖速度快； 使用材料少，生产效率高，省时省工； 节约空间有利于植物的工厂化生产； 在无菌条件下进行，不受病虫害侵害。 第二节 茎尖的培养 （一）茎尖微繁技术的过程：分5个阶段 1、无菌培养体系的建立、 2、芽的增殖 3、中间繁殖体的增殖 4、诱导生根 5、试管苗的移植 第二节 茎尖的培养 1、无菌培养体系的建立 初代培养建立的无性繁殖系包括： 茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。 外植体的制备 培养基 培养条件 第二节 茎尖的培养 2、芽的增殖（1）顶芽和腋芽的发育 顶芽、侧芽生长，形成一个微型的小灌木丛状的丛生苗结构。 丛生苗的每个枝条转接继代，可迅速获得多数的嫩茎。这种繁殖方式称作微型扦插或无菌短枝扦插 优点：不经愈伤组织，所以最能使无性系后代保持原品种的特性。 第二节 茎尖的培养 组织分离：用消毒的镊子将材料转到解剖镜下，一手用镊子将其按住，一手用灭菌后的解剖针将叶片叶原基去掉，露出生长点，切下顶端0.1-0.2mm长