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海洋凝集素及其与微生物相互作用 　　摘要： 海洋凝集素是来自海洋生物中的凝集素，它们往往具有各种各样的生物学活性。本文介绍了目前海洋凝集素及其与微生物相互作用的研究状况。 　　Abstract： The lectins were isolated from marine organisms with various biological activities. This reviews summarizes the recent process in marine lectins and its effects of marine lectins on microorganisms. 　　关键词： 海洋凝集素；微生物；相互作用 　　Key words： marine lectins；microoganism；effect 　　中图分类号：P7 文献标识码：A 文章编号：1006—4311（2012）28—0001—03 　　0 引言 　　凝集素（Lectin）发现于100多年前，近20多年以来，它成为了一个新的研究热点。凝集素一词来自拉丁语“Legere”，原意为选择的意思[1]。凝集素可以识别糖链结构并与之结合。凝集素还有一个名称“Hemagglutinin”，意思是血球凝集素，因为当时不知道血球表面的糖链特异性，所以使用了这个名称。凝集素传统的概念是除了酶和抗体，具有多价糖结合特性的蛋白质或者糖结合蛋白。但是后来的研究发现，原来知道的蓖麻毒素（Ricin），它是一种来自蓖麻的凝集素，具有RNA—N—糖苷酶活性（RNA—N—glycosidase）[2]，乳凝素—10（Galectin—10）、I—型凝集素都属于免疫球蛋白超家族[3，4]。虽然还不清楚某些凝集素具有催化活性的生理原因，但是凝集素的传统概念已经不能完全表达所有的凝集素了，只有多价糖链结合能力是凝集素的一个基本特证。迄今为止，还没有一个好的概念可以用来描述凝集素识别糖链结构的这一独特特性。 　　凝集素具有能够特异地识别并结合种类各异、多种多样的生物膜或溶液中的某种特定的糖链结构，因此，它常常被用来作为分离纯化多糖和糖聚合物的工具[5—8]，在癌症研究中作为早期细胞膜选择的探查和肿瘤细胞形成过程中糖的改变的诊断工具[9—11]，也作为免疫学的研究中的工具[12，13]。 　　1 海参凝集素 　　以日本Hatakeyama等为代表的学者从1994年开始系统地研究了海参（Cucumaria echinata）凝集素[14—17]。Hatakeyama等从海参中发现了4种Ca2+依赖凝集素即CEL—I、CEL—II、CEL—III和CEL—IV。SDS—PAGE结果表明，它们的分子量分别为27kDa、35kDa、45kDa和68kDa。CEL—I???CEL—IV可以强烈凝集兔红细胞和人红细胞，具有半乳糖/N—乙酰半乳糖胺特异性[15]。使用悬滴蒸汽雾化器制将纯化的CEL—I备出晶体，用X射线衍射观察了它的立体结构，它的立体结构是不均一的[16]。CEL—II不凝集任何血红细胞，免疫印迹方法研究表明，它具有去唾液酸胎球蛋白特异性。CEL—III对兔红细胞和人红细胞具有溶血活性，它可以凝集鸡和马的血红细胞，具有半乳糖/N—乙酰半乳糖胺特异性。Hatakeyama等进一步对温度、pH等因素对CEL—III的溶血活性影响进行了详细的研究[19]。2007年，Hatakeyama等更深入研究了CEL—III具有的蓖麻毒素型的β—三叶草折叠的三级结构，通过突变等手段研究了它的糖结合位点[17]。 　　2 贝类凝集素 　　海洋无脊椎动物种数、门数最为繁多，它们是海洋动物中的绝大部分。由于其大多数运动性较差，物理防御能力较弱（如移动等），同时由于它不具备脊椎动物的免疫系统，因此它抵御外来微生物及有害物质主要靠体液免疫系统。海洋无脊椎动物体液免疫系统含有多种重要的生理活性物质，如调理素、凝集素等。凝集素最早发现于植物中。相对于植物及微生物的凝集素来说，对海洋生物的凝集素研究得比较少。对海洋无脊椎动物凝集素的研究开始于20世纪初。至今已有400余种来自于海洋无脊椎动物不同组织中的糖特异性、结构和生理功能各异的凝集素被发现。 　　贝类属于软体动物门，双壳纲（Bivalvia）。目前约有1.1万种，80%生活在海洋。其身体侧偏，通常左右对称，具有两扇贝壳。由头、足、内脏囊、外套膜和贝壳组成。Bulgakov等[20]、Kim等[21]、Li等[22]以及Takahashi等[23]对菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）凝集素进行了系统研究。2004年，Bulgakov等将菲律宾蛤仔身体全部匀浆，抽提并通过黏蛋白亲和层析、离子交换层析、和分子筛层析得到了菲律宾蛤仔凝