依达拉奉注射液细菌内毒素检查质量标准研究.docVIP

依达拉奉注射液细菌内毒素检查质量标准研究 　　[摘要] 目的 统一依达拉奉注射液细菌内毒素检查限值，为依达拉奉注射液标准的提高提供参考。 方法 按《中国药典》2010年版二部附录细菌内毒素检查法，采用2个不同厂家的鲎试剂对5个不同厂家的依达拉奉注射液样品进行研究。 结果 依达拉奉注射液最大不干扰浓度为0.187 5 mg/mL，可将细菌内毒素检查限值在现行国家标准基础上统一提高至“每毫克小于0.33 EU”。 结论 统一后的限值可行，可更严格控制产品中的内毒素。 　　[关键词] 依达拉奉注射液；细菌内毒素检查；干扰试验 　　[中图分类号] R927.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）02（b）-0103-03 　　依达拉奉是一种脑保护剂（自由基清除剂），可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。临床上用于改善急性脑梗死所致的神经症状、日常生活活动能力和功能??碍。目前，关于依达拉奉注射液的细菌内毒素检查限值不统一。国家食品药品监督管理局标准YB细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于2.0 EU；国家食品药品监督管理局标准YB细菌内毒素检查限值为：每毫升中含内毒素量应小于0.5 EU；国家食品药品监督管理局标准YB细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于3.33 EU；国家食品药品监督管理局标准YB细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含细菌内毒素的量应小于2.5 EU。查阅国外药典，未见收载该品种。本实验参照依达拉奉注射液现行标准，《中国药典》2010年版二部“细菌内毒素检查法”[1]以及相关细菌内毒素检查的文献[2-10]，考察了5个厂家的产品，研究本品对细菌内毒素检查试验的干扰情况，探讨提高本品细菌内毒素限值的可行性，在实验基础上统一细菌内毒素检查质量标准。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　洁净工作台，苏净集团苏州安泰空气技术有限公司，VS-1300L-U；S648恒温水浴锅（上海医疗器械七厂），XW-80A混旋仪（上海沪西分析仪器厂有限公司），微量取液器（50～250 μL，上海荣泰生化工程有限公司），细菌内毒素检查用具（湛江博康海洋生物有限公司）。 　　1.2 试药 　　依达拉奉注射液，吉林省博大制药有限责任公司，批号：01-110904、01-110906，规格：20 mL∶30 mg。批号：02-110816、02-111108，规格：10 mL∶15 mg。吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司，批号：2012041101，规格：20 mL∶30 mg。扬州制药有限公司，批号规格：20 mL∶30 mg。国药集团国瑞药业有限公司，批号：1204068、1204069、 1204071，规格：20 mL∶30 mg。安徽威尔曼制药有限公司，批号：120423、120424、120515，规格：20 mL∶30 mg。 　　鲎试剂（福州新北生化工业有限公司，批号灵敏度：0.06 EU/mL；规格：0.1 mL/支。 湛江安度斯生物有限公司，批号：1211081，灵敏度：0.06 EU/mL；规格：0.1 mL/支）；细菌内毒素工作标准品（冻干品）（中国食品药品检定研究院，效价：120 EU/支，批号：150601-201072）。细菌内毒素检查用水（福州新北生化工业有限公司，批号规格：100 mL/瓶）。 　　2 方法与结果 　　2.1 鲎试剂灵敏度复核试验 　　将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，配制成2λ、1λ、0.5λ、0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，按照细菌内毒素检查法进行加样操作[1-2]。每种内毒素浓度分别平行做4管，同时用细菌内毒素检查用水作阴性对照做2管。按公式λc=antilg（ΣX/4）计算λc值，结果见表1。由结果可知，2λ管均为阳性，0.25λ均为阴性，阴性对照管为阴性，试验有效。两个不同厂家的2批鲎试剂灵敏度测定值均在0.5λ～2.0λ范围内，符合要求，可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。 　　2.2 内毒素限值（L）的确定[2-3] 　　参照上述4个国家标准，采用国内现行标准最严的限度：每毫升中含内毒素量应小于0.5 EU。由于本品20 mL相当于30 mg，并且其临床剂量以每公斤体重（mg）计，故将依达拉奉注射液细菌内毒素检查限值定为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于0.33 EU。 　　2.3 干扰试验预试验 　　目前市售鲎试剂λ通常在0.50～0.03 EU