临床分子生物检验复习提纲.docVIP

临床分子生物学检验 DVA的一级结构是由哪种化学键连接？ 两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核苷酸间：3’-5’磷酸二酯键 可以出现在人体循环系统中的游离核苷酸是？ 脱氧核苷酸，核糖核酸 原核生物DNA的复制方式是？θ型半保留复制 核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白？各自的作用有？ H2A、H2B、H3、H4：核心颗粒，形成核小体。H1：连接线上，锁定核小体、参与包装 PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些？过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶活性降低？ 游离的Mg2+浓度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团，螯合剂如EDTA均可与镁离子结合减少Mg2+浓度。 PCR扩增时，链的延伸从什么地方开始？对于引物是哪一端？模板链呢？ 从引物的3’端开始，方向5’到3’；模板DNA序列的3’端；3’端 在波长260nm的紫外线下，A值=1时双链DNA的浓度大约相当于？ 50ug/ml的双链DNA。（40ug/ml的单链DNA或单链RNA ，33ug/ml的单链寡聚核苷酸）（紫外分光光度法，核酸浓度的鉴定） 计算公式： 双链DNA ＝ 50×A260样本×稀释倍数 ÷1000（ug/ul） 单链DNA／RNA ＝ 40×A260样本× 稀释倍数÷ 1000（ug/ul） 单链寡聚核苷酸DNA ＝ 33×A260样本 ×稀释倍数／1000（ug/ul） 关于基因的定义正确的是？ 能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。 是遗传的结构和功能单位。 一个基因大都包括编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列，保证转录和加工所必须的调控序列（启动子，增强子），5’端、3’端非编码序列。 β—地中海贫血患者的基因缺陷主要是？ 基因突变中的点突变 10.Taq酶的特性有？ 有很高的耐热稳定性 酶量增加使反应特异性下降，酶量过少影响反应产量； Taq DNA聚合酶无3′→ 5′外切酶活性，因而无校正功能，在复制新链的过程中会发生碱基错配 ； Taq DNA聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为1/30000，碱基替换率为1/8000，因此扩增的片段越长，错配的机率越高。 实时荧光定量PCR技术中非特异性荧光染色技术？ SYBR Green I 12.人类基因组DNA多态性的形式？ 限制性片段长度多态性（RFLP）；短序列重复序列（STR）;单核苷酸多态性（SNP） 13.常用于菌种鉴定的分子标志物是？ 16sRNA 14.真核生物染色体的DNA三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是？ 15.原核生物RNA聚合酶的特性有？ 原核生物细胞中只有1种RNA聚合酶，可参与合成mRNA、tRNA和rRNA。 RNA聚合酶催化聚合反应时需要Mg2+或Mn2+。 该酶无校正功能。 PCR反应的特异性取决于？ 引物 DNA的变性是指？ 在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 变性后其它理化性质变化： 增色效应 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 18.参与DNA复制的酶有哪些？ （1）DNA聚合酶 （2）拓扑异构酶：:兼具内切酶和连接酶活力，能迅速将DNA超螺旋或双螺旋紧张状态变成松驰状态，便于解链。 (3）DNA解链酶 （4）单链结合蛋白(SSB)：结合在解开的DNA单链上，防止重新形成双螺旋。 (5）引物酶和引发体 ：启动RNA引物链的合成。 (6）DNA连接酶 第一个分离到的抑癌基因是？ 视网膜母细胞瘤基因 （Rb基因） 20.1978年简悦威采用Southen分子杂交技术检测出了什么疾病？ 镰状细胞贫血症 核酸的分离和纯化中，沉淀DNA的常用试剂是？ 常用的有机溶剂有： 乙醇、异丙醇、聚乙二醇 常用的盐类有： 醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵、氯化钠、氯化钾、氯化镁等。 通过紫外分光光度法可对核酸纯度进行鉴定，怎么鉴定？反过来是否成立？否 通过A260与A280的比值来判断有无蛋白质的污染。 在TE缓冲液中： 纯DNA的A260／A280比值为1.8； 纯RNA的A260／A280比值为2.0 【注意事项： （1）蛋白质及酚的污染均可使比值下降，可通过蛋白质在280nm的高吸收峰与酚在270nm的高吸收峰来鉴别。 （2）RNA污染可致DNA样品的比值高于1.8。 （3）比值为1.8的DNA溶液不一定是纯DNA溶液，可能兼有蛋白质、酚、RNA的污染。 （4）2.0是高质量的RNA的标志，但由于RNA二级结构的不同，其读数可能会在1.8～2.1之间波动。 RNA溶液的pH值会影响A260／A280的读数，在水溶液中A260／A280的比值比在T