化学检验方法注意事项.docVIP

一、定义 1、抗原(antigen)是一类能刺激机体免疫系统产生免疫应答(immune reponse)产物——抗体(Antibody)并能与之发生特异性结合的物质。 2、抗体（antibody）是抗原刺激机体的B淋巴细胞产生的具有特异性的免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig）。 3、抗药性（耐药性）：指病原微生物对抗生素等药物所产生的耐受和抵抗能力。 4、解抗剂（β-内酰胺酶）：β-内酰胺酶作为牛奶中抗生素的分解剂，从而使超标奶变成合格奶，产生人工无抗奶，可导致头孢菌素、青霉素等抗生素药类耐药性增高，大大的降低了人类抵抗传染病的能力。 5、色谱柱的作用：用于物质中组份的分离，利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。 二、原理 1、时间分辨荧光免疫层析原理： 样品溶液通过毛细作用在层析条上泳动，同时样品中的待测物与检测带上针对待测物的受体(该受体标记有Eu3+螯合物)发生高特异性和高亲和性的免疫反应，因而免疫复合物被富集或截留在层析材料的检测带上，而游离的标记物则会越过检测带。 2、牛乳中碱检测的原理： 玫瑰红酸的pH 变色范围为6.9～8.0，遇到加碱的乳，其颜色由棕黄色变为玫瑰红色，故可借此检出加碱乳，本方法的检出限0.01%（以碳酸钠计）。 3、亚硝酸盐定性显色法的检测原理： 亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后再与α-萘胺偶合成紫红色，颜色深浅与亚硝酸盐多少相关，标准牛奶的检出限为0.2mg/L（kg）（以亚硝酸钠计）。 4、酶联免疫分析方法(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay）： 酶联免疫分析方法属于固相酶免疫测定技术，以免疫学反应为基础,将抗原,抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。兽药残留检测主要应用酶联免疫法中竞争法来定量检测与食品有关的抗原（即兽药）含量。 5、胶体金免疫层析技术： 胶体金免疫层析技术就是以胶体金为显色媒介，利用免疫学中抗原抗体能够特异性结合原理，在层析过程中完成这一反应，从而达到检测的目的。 三、操作细节及注意事项 1、氯霉素的检测过程中加入乙酸乙酯的目的为，萃取样品中的氯霉素，是氯霉素与其它物质产生相分离，而有机溶剂易挥发，在氮吹仪的作用下挥发较快。 2、荷兰EP试剂盒检测黄曲霉B1，加入的终止液成分是硫酸，因为在强酸的条件下酶会被破坏，失去活性，蛋白质变性，从而颜色由蓝变黄。 3、黄曲霉毒素b1与黄曲霉毒素m1的区别，黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素,B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）.前者为基本毒性结构后者与致癌有关.M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物.所以m1大多存在于牛奶中，b1大多存在于植物性的物质里。 4、试剂盒上的字母的含义，C control 控制、质控线； T test 测试、检测带； S sample 样品、样品区； 5、样品的前处理为什么要进行冷冻离心：需要保证实验物质的生物活性，而大部分物质的生物活性在4度下才最活跃。 6、国产ELISA试剂一般都用辣根过氧化物酶制备结合物。 7、英国randox公司β-激动剂检测试剂盒的反应底物TMB在2-8℃容易结晶，使用前放置在室温下恢复温度，使用前要摇匀。 8、安一的时间分辨荧光法检测抗生素哪几个原因会造成假阳性：（1）药品与样品未混匀；（2）样品温度过高；（3）加热温度过高或者时间过长；（4）不同批次的药品混用；（5）药品保存不当。 9、英国randox公司β-激动剂检测试剂盒的显色是酶催化无色的底物生成有色的产物，通常在20-25 ℃暗处反应15-30min显色很深时可提前终止反应。 10、在使用北京路桥公司氯霉素快速检测试纸条法时，请按照操作步骤进行测试，操作时请勿触摸试纸条显色区。