第六章_微生物的生长与其控制_周德庆.pptVIP

连续培养的优缺点 优点：高效；自控；稳定；节约 缺点：菌种易退化；易污染杂菌；营养物的利用率低 应用：酵母菌单细胞蛋白（SCP）、乙醇、乳酸等发酵、污水处理 * 微生物的高密度培养（HCDC） 也称高密度发酵，一般指微生物在液体培养基中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术 选取最佳培养基成分和各成分含量 补料 提高溶解氧的浓度 防止有害代谢产物的生成 * 高密度培养实例 E.coli的高密度培养理论值 可达到200g(湿)/L～ 400g/L，即使为200g/L， 则发酵液中菌体约占1/4，其流动性丧失 E.coli的高密度培养报道值 PHB的工程菌为175.4g/L，W3110菌株菌值174g/L 获取HCDC必须综合考虑与充分运用各菌株的生长繁殖的规律，以获取最佳效果 * 结束 * * 同步生长的概念：采用一定的方法使细胞群体处于分裂步调一致的状态，称为同步生长。 环境诱导法：通过环境条件的变更来诱导细胞生长的同步。例如变换温度、光线或对于稳定期的培养物添加新鲜培养液来实现。 物理学方法： 通过物理学方法从随机的、不同步的细胞群体中选择出同步的个体群。例如选择性过滤或梯度离心法来达到。 * 将异步生长的菌液通过垫有硝酸纤维薄膜的滤器，不同生长阶段的细菌均吸附于膜上，然后翻转滤膜，用无菌的新鲜培养液慢速洗脱，最初流出的是未吸附的细胞，不久，膜上细胞开始分裂，分裂后的子细胞有的不与膜接触易随培养液流下。若滤膜面积足够大，只要收集刚滴下的子细胞培养液即可获得满意的同步生长的细胞。 * 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线，称为生长曲线(growth curve)。当把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中，在适宜的温度、通气等条件下，该群体就会由小到大，发生有规律的增长。如以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可画出一条由延滞期、指数期、稳定期和衰亡期4个阶段组成的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。说其“典型”，是因为它只适合单细胞微生物如细菌和酵母菌， * * * 如大肠杆菌胸腺嘧啶缺陷型菌株在缺少胸腺嘧啶时DNA合成停止，但RNA和蛋白质合成不受影响，30 min后加入胸腺嘧啶，DNA合成立即恢复，40 min后几乎所有细胞都进行分裂。也可将不同步菌液在有一定浓度抑制剂(如氯霉素)的培养基里培养一段时间后再接到另一完全培养基中，获得同步生长细胞 * * * 酵母菌单细胞蛋白（SCP） * * * * 连续培养的优点： 生产周期短，设备利用率和生产效率高。 便于自动化控制，产品质量稳定。 连续培养的缺点： 时间长，易受杂菌污染，难以控制。 菌种易退化 营养物利用率、产物收率比分批培养低，生产成本高。 * 第6章 细菌的生长及其控制 * 第二节 微生物的生长规律 同步生长的概念：采用一定的方法使细胞群体处于分裂步调一致的状态。 环境诱导法：变换温度、光线或对于稳定期的培养物添加新鲜培养液。 物理学方法： 通过物理学方法选择。例如选择性过滤或梯度离心法。 * 两种同步法 环境条件诱导法：如用氯霉素抑制、藻胞的光照、黑暗、控制等，可能造成细胞循环周期改变。 机械选择法：膜过滤法、膜洗脱法、密度梯度离心法等。 同步生长法特点： 同步性丧失：在培养过程中，其同步性丧失较快。 丧失的原因：群体中的不同细胞个体间分裂周期差异。 * 获得同步生长的方法： 诱导法：变换温度、光线、培养基等。造成与正常细胞周期不同的周期变化。 选择法：选择性过滤、梯度离心。物理方法，随机选择，不影响细胞代谢。 * 原理：细菌细胞会紧紧粘附于硝酸纤维微孔滤膜上。 步骤：菌悬液通过微孔滤膜，细胞吸附其上；反置滤膜，以新鲜培养液通过滤膜，洗掉浮游细胞；除去起始洗脱液后就可以得到刚刚分裂下来的新生细胞，即为同步培养。 * 典型生长曲线 概念：定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线称为生长曲线（growth curve）。 条件：将少量纯种单细胞微生物群体、接入适宜的恒定容积的培养液中，在适宜温度、通气与酸碱度等条件下，微生物群体细胞量有规律地增加的过程。 只适用于单细胞微生物如细菌和酵母菌。 * 生长曲线（growth curve） 结果：根据微生物的生长速率常数即每小时分裂次数（R）的不同，以细胞数目的对数值为纵坐标与培养时间作横坐标，绘制出的由延滞期、指数期、稳定期和衰亡期4个阶段组成的曲线。 典型生长曲线 延滞期 指数期 稳定期 衰亡期 * 生长曲线 生长曲线图示 延滞期 对数期 稳定期 衰亡期 * （2指数期（exponential phase） 又称对数期（logarithmic phase）：群体细胞分裂与其数量以几何级数增加的一