抗心律失常药物用的研究.ppt

试验 抗心律失常药物用研究 一、目的 掌握心律失常病因及治疗药物作用机制。 学习心律失常动物模型建立方法及相关评价指标的观察。 学习动物试验基本技术-大鼠捉拿、固定及不同途径给药方法。 学习动物血压测量的方法。 观察受试化合物抗心律失常作用。 二、与试验相关的理论知识要点 1.抗心律失常药物及作用机制 心脏内的激动起源或者激动传导不正常，引起整个或部分心脏的活动变得过快、过慢或不规则，或者各部分的激动顺序发生紊乱，引起心脏跳动的速率或节律发生改变，就叫心律失常。 2.常见心律失常模型如下： 电刺激猫或家兔心脏诱发的心律失常。 观察指标：测定室颤阈。 结扎冠脉前降支形成的心律失常。大鼠冠脉结扎、狗冠脉两期结扎。 记录Ⅱ导ECG并观察： ①心律失常(室早VP，室速VT)出现的时间、心律失常程度(VP、VT数)、药物作用维持时间、恢复窦性心律动物数/动物总数。 ②房颤或室颤发生率和死亡率。 三、教学试验安排及内容 四、试验方法及步骤 （二）试验步骤 1.取大鼠，称体重； 2.腹腔注射乌拉坦1～2g/kg（20%，5～6ml/kg）麻醉，仰卧位固定于手术台上； 3.分离颈总动脉，作颈总动脉插管术测定血压； (1)剪开颈部皮肤，可用止血钳钝性分离颈部皮肤，在气管旁边找到右侧颈总动脉，此处注意勿损伤表面的细小血管，而导致手术视野不清楚。 (5)用备用的手术线结扎塑料套管。 随后去掉动脉 夹，测定血压。 5.静脉给药（可采用舌下静脉给药等方式） 给药顺序-上半班： 下半班： 学生分组及试验给药方案 试验结果原始记录 表2 受试化合物对肾上腺素诱发心律失常大鼠失常次数、时间的影响 五、试验报告内容及格式要求 注意事项： 动物个体较小，固定大鼠时尤其两前肢不宜过紧，以免影响呼吸。 在使用过程中，血压换能器内不能留有气泡，否则影响测量的精确度。 血压换能器内需充满含有肝素的生理盐水；每次使用完血压换能器后，需要及时冲洗，防止血液凝固在管腔内影响测量的精度。 血压换能器最好和桌面水平。 留置针需要用含有肝素的生理盐水提前浸泡一下，一方面是为了抗凝，一方面是为了润滑管壁，方便插入血管。 附：常见心电图表现 * 药物诱发的心律失常： ①肾上腺素或氯仿-肾上腺素引起室性心律失常； ②洋地黄引起室性心律失常； ③乌头碱引起室性心律失常； ④氯化钡或氯化钙引起室性心律失常； ⑤电刺激心室引起心室颤动。 由于各类抗心律失常药物的作用机理不同，因此当知道所试药物属于何类时，应选择相应的敏感模型。 教学分组 在一个教学单元内，根据学生人数，将学生分为8组， 每组2～5人，并分成上下两班，4组/班。 试验方案 1.上半班采用肾上腺素造模，普萘洛尔作为阳性对照药。 2.下半班采用氯化钙造模，维拉帕米作为阳性对照药。 3.上下半班均采用同一受试物进行观察，通过药物对 不同心律失常模型的作用，初步探讨药物可能的机制。 （一）试验材料 1.动物：大鼠250～300g，雌雄各半。 2.药品：生理盐水；5%葡萄糖输液；0.5％肝素 ； 乌拉坦（Urethane），生理盐水配制成20%溶液备用； 盐酸维拉帕米（Verapmil Hydrochoride），配成0.2%溶液备用； 盐酸普萘洛尔（Propranolol Hydrochoride），配成0.1%溶液备用； 肾上腺素，生理盐水配制成0.01%溶液备用； 氯化钙，生理盐水配制成3.5%溶液备用； 3.受试物：由各教学单位自备。 建议受试物，丹参酮ⅡA磺酸钠，配制成5%葡萄糖 配制成0.2%、1%备用。 4.器材：生物机能试验系统、动物秤、大鼠手术台、1ml、5ml注射器、静脉留置针、5#、6#针头。 （2)颈总动脉弹性较大，分离颈总动脉后， 使用眼科镊进一步分离1厘米左右的长度。 （3）穿手术线，一根用来结扎远心端，一根备用； 用动脉夹暂时封闭近心端。 (4)用眼科镊的柄放置在右侧颈总动脉管下，做为插管的依托，然后用留置针向心方向插入血管，直到动脉夹处，然后拔出留置针中的金属针，留下外面的塑料套管。 4.针型电极插入大鼠皮下，打开生物机能试验系统，待心电图稳定后开始实验，先记录一段正常的大鼠心电图； （1）静脉注射生理盐水1ml/kg，5min后； （2）静脉快速注射0.01%肾上腺素溶液1ml/kg，记录大鼠血压、心 电图，恢复正常后进行下一轮实验。 （3）静脉注射0.1%普萘洛尔1ml/kg，5min后； （4）静脉快速注射0.01%肾上腺素溶液1ml/kg，记录大鼠血压、心 电图，恢复正常后进行下一轮实验； （5）静脉注射0.2%丹参酮ⅡA磺酸钠