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从鱼油中提取DHA、EPA技术的研究现状 　　?鱼油中富含具有重要生理功能的DHA、EPA，故从鱼油中分离制备高度不饱和脂肪酸(PUFA)，引起国内外广泛重视。鱼油的开发利用关键，是对鱼油中DHA，EPA等PUFA进行分离制备，以去除色素、胆固醇、饱和脂肪酸等非必需成分。 　　??目前，从鱼油中提取EPA、DHA的方法很多，各有优缺点。下面将主要介绍一下国内外提取EPA、DHA的方法。 　　??1、尿素包合法 　　??尿素包合法是一种较常用的多价不饱和脂肪酸分离方法，其原理是尿素分子在结晶过程中与饱和脂肪酸或单不饱和脂肪酸形成较稳定的晶体包合物析出，而多价不饱和脂肪酸由于双键较多，碳链弯曲，具有一定的空间构型，不易被尿素包合，紫苏油中ALA，鱼油中EPA与DHA都以甘油三酯的形式等几率分布，空间位阻较大，难以直接包合，我们的做法是将其转化为脂肪酸酯或脂肪酸的形式后再进行包合。再采用过滤方法除去尿素包合物，就可得到较高纯度的多价不饱和脂肪酸。 　　??尿素包合法是采用乙醇作有机溶剂。乙酯化鱼油、尿素、乙醇按1：2：6的投料比例进行。 　　??首先将200kg尿素加入到600kg乙醇溶剂当中。待完全溶解后，缓慢加入100kg乙酯化鱼油，控制温度不超过75在搅拌状态下包合30min：反应结束后，静止冷却至室温使尿素充分结晶，形成包合物。此时利用离心分离技术回收尿素，再将滤液进行乙醇回收、酸洗和水洗等过程除去溶液中的乙醇和残存的尿素，即可得到包合后的高不饱和脂肪酸乙酯浓缩液。(注：使用尿素试纸检测浓缩液中尿素是否完全除净) 　　??对高不饱和脂肪酸乙酯浓缩液分别进行定性定量检测。经气相色谱分析，其中EPA和DHA含量可在60％以上；称量浓缩液约在4kg左右，即收率可达到40％以上。 　　??2、低温冷冻法 　　??根据脂肪酸混合物在过冷有机溶剂中溶解度的不同达到分离的目的。饱和脂肪酸在有机溶剂(常用丙酮)中的溶解度与碳链的长度成反比；而同一不饱和度的脂肪酿，碳链越长，溶解度越低；对同样碳链数目的不饱和脂肪酸，随双键数的增加，溶解度增加。而且低温条件下，这种溶解度的差异更加明显，所以在低沮下将脂肪酸混合物镕于有机溶剂中，通过过滤，就可以除去其中大量的饱和脂肪酸和部分低不饱和脂肪酿，使EPA和DHA的总含量达到30％左右。用此种方法分离，需有极低温的冷却设备，成本比较高。 　　??3、金属盐沉淀法 　　??利用饱和脂肪酸、低不饱和脂肪酸以及EN和DHA的金属盐在某种有机溶剂中溶解度的不同进行分离。饱和脂肪酸的金属盐比不饱和脂肪酸的金属盐在有机溶剂中的溶解度小，特别是在含5％水份的丙酮或乙醇中。其中钠盐、锂盐法应用最多，浓缩后得到的EPA和DHA总含量可达到70％~75％， 　　??4、皂化—尿素包合法 　　??EPA、DHA的初步纯化(皂化、酸化)将溶有鱼油量的15％Na0H的工业酒精溶液与鱼油混合，同时加入少量硬脂酸，搅拌至肥皂大量出现，静置1h压滤，滤液冷藏过夜(也可以室温放置过夜)，再次过滤除皂，滤液以HCL调PH＝3，冷藏(或室温)放置过夜，过滤，分出少量饱和硬脂酸，滤液可减压回收70％溶液，浓缩液以水洗至中性，干燥得富含EPA，DHA制剂。也可以继续进行尿素包合纯化鱼油多烯脂肪酸。 　　??二次纯化(尿素包合)为了得到EPA、DHA含量更高的产品，进行二次纯化在上一步酸化过滤除去饱和硬脂酸之后所得到滤液中直接加入一定量的尿素，加热至溶解（≤70)，之后自然冷却至室温．过滤除去尿素包合物，滤液也可以置于冷柜过夜．再次过滤除去结晶，所得滤液可先回收部分溶剂．水洗油层至中性。干燥，即得产品。水洗液可回收乙醇。对尿素包合物加水加热溶解静置分层，分出上层油水洗，干燥得副产品(主要是低不饱和酸和一定量的不饱和脂肪酸)，尿素回收。 　　??5、鱼油交酯化 　　??在碱性催化剂存在时，通过用乙醇置换油脂中的甘油，制取脂肪酸乙酯．鱼油乙酯化的目的在于将鱼油中的高不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(DA)和二十二碳六烯酸(DM)分离出来。 　　??将100kg鱼油加温到72℃—76℃．在搅拌条件下加入40kg配制好的的NaOH—C2H5OH溶液进行酯化，反应30min左右，检测pH值如已达到13—14，副反应完全中止。此时加配制好的1：1的C2H5OH—Hcl溶液进行酸化反应。控制温度在70以下酸化20min左右，然后关闭搅拌，静止沉陷20min后，放出下层甘油、水和盐分，取上层乙酯比鱼油转入下一工序。该步可得乙酯化鱼油110~120kg，经气相色谱分析，DAH+EPA纯度仅为30％左右。 　　??6、真空蒸馏法 　　??原理尿素包合法浓缩的鱼油，EPA和DHA含量最高只能达到70％左右(实验室可达70％以上)，但是为了达到70％以上或更高的纯度，并起到脱色