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育珠贝细胞小片及处理技术研究进展 第30卷第4期广东海洋大学Vol.30No.4 2010年8月JournalofGuangdongOceanUniversityAug.2010 收稿日期:2010-08-03 基金项目:国家科技支撑计划项目2007BAD29B08 第一作者:王梅芳(1964-),女,教授,主要从事贝类发育生物学及遗传育种.E-mail:wangmf@ 通讯作者:余祥勇,男,教授.E-mail:yuxyong@,Tel:0759-2382184 育珠贝细胞小片及处理技术研究进展 王梅芳,余祥勇 (广东海洋大学水产学院,南海水产经济动物增养殖广东普通高校重点实验室,广东湛江524025) 关键词:珍珠培育;外套膜小片;处理技术 中图分类号:S968.35文献标志码:A文章编号:1673-9159(2010)04-0086-06 我国是世界上最早利用贝类培育珍珠的国家 之一,但与之相关的科研活动起步却较晚.自20 世纪50年代末,我国开始进行人工养殖珍珠的探 索性研究,随后围绕育珠,养殖,种苗生产及良种 选育等多方面研究[1-10] 相继展开,其中对育珠贝的 生殖习性,病敌害防治和种苗生产技术研究,解决 了育珠母贝来源的难题;对育珠贝形态结构,生理 机能,插核技术等方面的研究,掌握了人工育珠技 术.近年来,一些新技术与方法的应用,使珍珠研 究的深度与广度得到进一步拓展,为珍珠养殖业的 健康发展奠定良好基础. 目前用于培育珍珠的贝种主要有淡水蚌类(三 角帆蚌HyriopsiscumingiiLeach,褶纹冠蚌Cristaria plicataLeach,池蝶蚌HyriopsisSchlegeli,背角无 齿蚌Anodontawodianalea等)和海水珍珠贝(马氏 珠母贝Pinctadafucata,大珠母贝Pinctadamaxima 和企鹅珍珠贝Pteriapenguin,珠母贝Pinctada margaritifeara等).培育珍珠(有核珍珠和无核珍 珠)的过程均需进行外套膜植片,被移植的外套膜 细胞小片的上皮细胞经迁移,增殖,包裹(珠核) 形成珍珠囊,继而分泌珍珠质形成珍珠.珍珠培育 过程包括育珠贝术前处理,细胞小片处理,育珠贝 术后休养[1,11-16] 等技术环节.而细胞小片处理技术, 直接与珠质分泌及珍珠质量密切相关. 为提高育珠效果,学界从理论到生产实践的各 阶段和环节均作了有益探索,对外套膜细胞小片也 进行了较深入研究,从外套膜小片细胞的形态结构, 分泌机能到组织细胞的体外培养,从小片制备,小 片规格,小片植入技术到小片处理液(或保养液) 的筛选等,研究内容十分全面.本文就研究情况和 新进展进行综述,旨在为育珠相关研究的开展提供 参考. 1组织学,组织化学,细胞生物学研究 从显微和超微水平上研究外套膜组织或细胞的 形态结构,分泌状态等,可了解小片细胞的行为及 分泌特征与规律,进一步掌握与利用珍珠分泌规律 促进珍珠的生长.通过研究珍珠形成的有关生物学 机理,可为提高珍珠分泌速度和质量提供生物学基 础资料.早在1963年,熊大仁等进行了河蚌无核珍 珠形成研究,侧重于探讨生产中如何提高珍珠质 量,并通过组织学观察发现珍珠囊的形成是小片上 皮细胞增殖的结果:植入蚌体后4~5d,细胞小片 边缘即与蚌组织愈合并逐步形成完整的珍珠囊[17] . 形成珍珠囊的是外套膜壳侧表皮细胞,这些细胞具 有分泌珍珠质而形成珍珠的能力[18] .在组织学方面, 日本的小林等观察到珍珠囊表皮细胞与外套膜表皮 细胞在形态上有显着差异[19] ;石安静等用透射电镜 观察到三角帆蚌外套膜外表皮中有柱状表皮细胞, 胞质中有成群线粒体的两类细胞,外表皮细胞中具 有较多的溶酶体,从而认为外表皮均有较强的分泌 和吸收机能[20] ;他们利用扫描电镜观察了河蚌外套 膜内,外表皮及结缔组织表面结构,并对珍珠质等 分泌物来源及分泌的途径进行了探讨[21-23] .舒凤月 等用电镜观察了褶纹冠蚌的外套膜结构,认为其内, 外表皮的结构,细胞类型的差异可能与外套膜内, 外表皮所行使的功能不同有关[24] . 王梅芳等:育珠贝细胞小片及处理技术研究进展87第4期 对三角帆蚌珍珠囊形成的研究[25] 表明,小片细 胞先形成”初生珍珠囊”,之后育珠蚌结缔组织最 内层细胞再转化为上皮细胞,形成一层”次生珍珠 囊”上皮细胞.研究[25-26] 认为在珍珠囊形成过程中, 插入小片细胞和育珠蚌结缔组织细胞在发生一系 列形态结构和位置变化的同时,还有细胞”识别” 现象.进一步对三角帆蚌珍珠囊细胞的分泌活动的 研究[27] 还发现珍珠囊表皮细胞能旺盛地进行物质 合成,且与外套膜结缔组织腺细胞分泌的中性黏多 糖一起,共同参与珍珠结晶层的形成,而珍珠囊细 胞分泌的多样