第五节 应动力学.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 问答题 1、影响酶促反应的因素有哪些？它们是如何影响的？ 2、试比较酶的竞争性抑制作用与非竞争性抑制作用的异同。 3、什么是米氏方程，米氏常数Km的意义是什么？试求酶反应速度达到最大反应速度的99％时，所需求的底物浓度（用Km表示） 4、什么是同工酶？为什么可以用电泳法对同工酶进行分离？同工酶在科学研究和实践中有何应用？ 5、举例说明酶的结构和功能之间的相互关系。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 释放有活性的催化亚基 依赖于 cAMP的蛋白激酶；存在没有活性的四聚体形式，含两个催化亚基和两个调节亚基。每个调节亚基上含一段假底物序列（pseudosubstrate sequence ），该序列结合到催化亚基的活性中心上，通过阻断底物的结合，抑制催化亚基的活性。 别构效应物cAMP结合到调节亚基上诱导假亚基序列构象改变，使其不能与催化亚基结合，寡聚酶解聚产生两个有活性的单肽催化亚基和一个调节亚基二聚体。 随cAMP水平下降，通过重新形成无活性的四聚体，使依赖于 cAMP的蛋白激酶活性被重新关闭。 二、 酶的共价修饰调节 ?共价修饰(covalent modification) 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。 ?常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见） 乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化 腺苷化和脱腺苷化 －SH与－S－S互变 P328 共价修饰调节 该调节由共价调节酶完成。 共价调节酶是一类在其它酶的作用下，对它的结构进行共价修饰，从而使其在活性形式与非活性形式之间转变的酶。 共价调节酶的基本特征： 共价调节酶一般存在相对无活性和有活性两种形式，这两种形式之间互变的正、逆向反应由不同的酶催化。 磷酸化与去磷酸化 蛋白质活性调节的一个主要机制是在丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上加一个磷酸和去除磷酸基团。其中蛋白激酶催化磷酸化，磷酸酯酶催化去磷酸化。作用相反的激酶和磷酸酯酶给细胞提供了一个“开关”，开启和关闭各种蛋白的功能。 磷酸化改变蛋白电荷，通常导致蛋白构象的变化，构象变化的效应是明显的改变蛋白质与配基的结合，从而影响其活性。 酵母中，近3％的蛋白质为激酶和磷酸酯酶，它们的靶分子涵盖了所有种类的蛋白质，包括结构蛋白、酶、膜上的通道、信号分子。 酶的磷酸化与脱磷酸化 -OH 酶蛋白 H2O Pi 蛋白磷酸酯酶 ATP ADP 蛋白激酶 Thr Ser Tyr -O-PO32- 酶蛋白 Thr（苏） Ser Tyr（酪） 三、酶原和酶原的激活 ●酶原(zymogen)：酶的无活性的前体 ●酶原的激活：由无活性的酶原转变为有活性的酶的过程。 ●酶原激活的意义： 在特定的环境和条件下发挥作用； 避免细胞自身消化； 有的酶原可以视为酶的储存形式。 P81 酶原激活的机理: 酶 原 分子构象发生改变 形成或暴露出酶的活性中心 一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽 在特定条件下 赖 缬 天 天 天 天 甘 异 赖 缬 天 天 天 天 缬 组 丝 S S S S 46 183 甘 异 缬 组 丝 S S S S 肠激酶 胰蛋白酶 活性中心 胰蛋白酶原的激活过程 胰蛋白酶原 胰蛋白酶 六肽 + 弹性蛋白酶原 弹性蛋白酶 + 碎片 胰凝乳蛋白酶原 α-胰凝乳蛋白酶 +二肽 羧基肽酶原A 羧基肽酶A + 碎片 肠激酶 自身催化 肠激酶启动的酶原激活 消化道内几种蛋白酶的专一性 （芳香） 赖、精（碱性） （丙、甘、短脂肪链） 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶 弹性蛋白酶 羧肽酶 胰蛋白酶 氨肽酶 羧肽酶 （芳香） 四、酶的多种分子形式--同工酶 同工酶(isoenzyme)是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质、免疫学性质不同的一组酶。 存在于同一种属或不同种属，同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞，具有不同分子形式但却能催化相同的化学反应的一组酶，称之为同工酶 H H H H H H H M H H M M H M M M M M M M LDH1 (H4) LDH2 (H3M) LDH3 (H2M2) LDH4 (HM3) LDH5 (M4) 乳酸脱氢酶的同工酶 [举例]：乳酸脱氢酶(LDH1～ LDH5) 乳酸脱氢酶同