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蛋白质工程第四章 蛋白质物理化学质及蛋白质结构解析
第四章 蛋白质的物理化学性质及结构解析 热力学与蛋白质构象 突变、稳定性和折叠 X射线晶体结构分析 核磁共振波谱的溶液结构解析 热力学函数与蛋白质构象 蛋白质(多肽链)内能 蛋白质的构象--多肽链与溶液的相互作用形成 内部运动决定 维持蛋白质三维结构的作用力主要是弱的相互作用力:静电力、范德华力、氢键等 静电相互作用 范德华相互作用 氢键 体系中含有大量氢键,在维持结构方面起重要作用 疏水效应 蛋白质中含有较高比例的非极性氨基酸残基 二硫键 通常在肽和蛋白质分子中的半胱氨酸残基中的键 盐桥 突变、稳定性和折叠 体外突变技术 用酶学和化学方法剪切或合成DNA,将突变 导入到克隆化的基因中,再将改变的基因重新 克隆到生物体中分析该基因的功能变化的技术。 随即突变 定点突变 * * 关系? 热容量 系统的热容量与状态的转变过程有关。采用量热实验 (微分扫描量热仪)可以直接测定热容量的变化。 热容量的变化--蛋白质的折叠和退折叠过程 蛋白质的构象与热运动 蛋白质的构象取决于两个方面: 1、多肽链与溶液分子的相互作用 2、蛋白质分子的无规则热运动 怎么从分子的相互作用解释蛋白质天然结构的稳定性? 弱的相互作用力对蛋白质的稳定性作用可以用“水”的性质解释 纯水中含有氢键网格,存于水中的分子会干扰水分子中氢键的形成,导致体系中的墒升高,墒的升高是水溶液中形成疏水作用的主要动力。 生理条件下,蛋白质中氢键和离子键的形成主要是墒作用所驱动。蛋白质的内部一般是由疏水侧链形成的紧密堆积的核,疏水作用是稳定蛋白质构象的主要作用。
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