纠正与预防措施的管理.pptVIP

第五章 甾体激素类药物的分析 一、基本结构与分类 1. 具有环戊烷并多氢菲母核 2. 肾上腺皮质激素类 代表药物： 氢化可的松、醋酸地塞米松等 3.雄性激素及蛋白同化激素类 代表药物： 甲睾酮、苯丙酸诺龙等 4. 孕激素类 代表药物：黄体酮等 5. 雌激素类 代表药物： 雌二醇、炔雌醇等 二、鉴别 1.与强酸的呈色反应 与H2SO4、H3PO4、HClO4和HCl等反应后呈色 以H2SO4用的最广 2.制备衍生物测定熔点 3.官能团反应 1） C17 – α – 醇酮基： + 2）酮基 +羰基试剂 显色（腙） 常见羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼 3）甲酮基 +Na2[Fe(CN)5NO] 显色 4）酚羟基 +重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料） 三、杂质检查 1.主要的特殊杂质包括其他甾体、硒等 2. 其他甾体： 与标示药物结构不同的甾体化合物 来源：原料、中间体、异构体、降解产物 特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似 方法： TLC法、 HPLC法 1）TLC法： 多采用自身对照法 显色方法：四氮唑盐、硫酸－乙醇 判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色 2）HPLC法 自身对照法 四、含量测定 包括HPLC法、紫外分光光度法、比色法等 1.异烟肼比色法 1）原理： C3-酮基 异烟腙 2）操作： 对照液 供试液 3）注意事项： 反应速度和专属性： C3= O ＞ C17= O 、 C20= O， C11= O 不反应 C3-酮基有一定专属性 溶剂的选择： 异烟肼、盐酸 无水乙醇或无水甲醇 酸、异烟肼的量： 盐酸：异烟肼 = 2：1 酸度↑ 异烟肼盐↓ 酸度↓ A↓ 样品：异烟肼 = 1：8 水分、O2与光线的影响： 含水量↑ 腙水解↑ A↓ 溶剂不挥发、不吸收水分时 O2与光线无影响 温度的影响： 温度↑ 反应速度↑ 2. 四氮唑比色法 1）原理 肾上腺皮质激素类 C17-α-醇酮基 + ChP采用TTC（RT） USP采用 BT 2）操作 对照液 供试液 3）注意事项 基团对反应速度的影响 C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 C16无论何种取代基ν↓ 溶剂、水分的影响 O2与光线的影响 碱的影响 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： 皮质激素 四氮唑 碱 温度和反应时间 t℃↑→ν↑ t℃↑ →甲潜分解↑ ChP 25℃ 40～45′ BP 30℃ 1h 2. Kober反应比色法 1） Kober反应原理： 2）改良的Kober反应： 使用铁-酚试剂： [(NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] 也被称为：Kober反应---铁-酚试剂法 加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光 3）特点： 优点 较高的灵敏度 具有一定的选择性 缺点 非化学计量反应 * 可分为： 肾上腺皮质激素类 雄性激素及蛋白同化激素类 孕激素类 雌性激素类 还 原 性 C17 – α – 醇酮基 UV、与羰基试剂反应 △4 – 3 – 酮 性 质 主要活性基团 可成酯 C17 – β – 羟基 UV、与羰基试剂反应 △4 – 3 – 酮 性 质 主要活性基团 与亚硝基铁氰化钠反应 C17 –甲酮基 UV、与羰基试剂反应 △4 – 3 – 酮 性 质 主要活性基团 与AgNO3反应 C17 –乙炔基（部分） 可成酯 C17 –羟基 UV、与重氮苯磺酸盐反应 A环为苯环,3–OH 性 质 主要活性基团 Fehling试剂 Cu2O