第六章细菌和噬体的遗传分析.ppt

第六章 细菌和噬菌体的遗传分析 第一节 细菌的遗传分析 一、细菌的生物学特征 细菌是单细胞生物，完成每个世代只需20分钟，而且容易得到它的生化突变型，它不仅在医学上和农业上重要，而且从进化角度上也是异常成功的，因为它占据地球上大部分的生物干重。 研究细菌遗传的方法：主要是对细菌菌落形态的遗传研究 (如图，霉菌菌落) 原则上说，培养皿中每个细菌长成的菌落应具有共同的遗传组成，但是由于偶然发生的突变：形态性状的突变，生理特性的突变或抗性的突变，而使这些突变后的细菌所形成的菌落与其他的菌落有所不同。 菌落形态性状的突变包括：菌落的形状、颜色和大小等。 霉菌菌落 大肠杆菌 二、细菌的突变型 （一）营养缺陷型 生理特性的突变包括：丧失合成某种营养物质能力的营养缺陷型。 （二）抗药突变型 抗性突变包括：抗药性或抗感染性。 三、细菌有性杂交 1964年Ledeberg和Tatum用大肠杆菌K，证明细菌有性杂交存在。 （一）大肠杆菌杂交试验 A bio-(生物素) met-（甲硫氨酸） thr+（苏） leu+（亮） thi+（VB1） B bio+(生物素) met+（甲硫氨酸） thr-（苏） leu-（亮） thi-（VB1） A、B都为营养缺陷型，在基本培养基上不能生长。 1、个别细菌由营养缺陷型转变为原养型 a、基因突变 A bio- met- bio+ met+ 或 B thr- leu- thi- thr+ leu+ thi+ 但单独培养都未突变，间接说明不是。 b 、A B二细菌杂交 得 bio- met- thr+） leu+ thi+ bio+ met+ thr+ leu+ thi+ bio+ met+ thr- leu- thi- 2、营养物质互补 A 能合成B不能合成物质,而B能合成A不能合成物质，混合后二种物质被同一细菌利用，可生长。 （二）U实验 1950年Davis（戴维斯），做了U实验，在U底部中间用滤片隔开，交替吸压 （三）电境观察--接合管 结果不同，表明A、B有性杂交作用不同，提出遗传物质单向转移。 供体：提供遗传物质的细菌 雄性 A 受体：接受遗传物质的细菌 雌性 B 所以 A→B 不久发现导致单向转移的是细胞质中一个微小可转移因子——F因子 四、大肠杆菌 F- F+ Hfr F/菌株 （一）F- F+ 菌株 1、F因子结构: 细胞质中环状DNA，分三个区段 原点：转录起点 致育基 致育基因：决定细菌的育性, 含有育性区的大肠杆菌在细胞 表面有很多毛状的性纤毛（或性伞毛）。 配对区：与细菌环状染色体配对区段相对应，通过简单的单交换可到细菌染色体上。 2、F因子存在方式 游离状态：在细胞质中 ，能自我复制独立遗传 整合状态：整合到细菌环状染色体上，与细菌染色体一起遗传。 3、F因子的特性 （1）决定大肠杆菌育性 F+菌株，含游离F因子 供体 雄性 F－菌株，无游离F因子 受体 雌性 （2）F因子高频率转移 当F+×F－, F+的F因子复制为二,通过接合管将F因子传递给F－菌株,使F－转变为F+,频率高达95%,即高频率的转移F因子. 接合管的形成：菌株靠近→细胞膜融合→两细胞间形成接合管 F因子转移：F因子从原点断裂，以原点为先导，边复制边转移（因此叫滚环复制），复制后的F因子转移到另一个细胞中。细胞分开，使F-变成F+。 (3)基因重组的频率低 当F+×F－, F+菌株环状DNA复制通过接合管进入F-细菌细胞，与F-细菌的基因交换，使基因重组，但频率很低＜1%，菌落很少。 (4)F因子可以自发丧失 （二）高频重组菌株 （Hfr菌株） 1951年，卡瓦里（Cavalli）等人，1954年海斯（Hayes）先后在A菌株中分离出新的菌株。 1.1.特点 (1 1)可以作为供体，与B杂交，重组频率比A×B高1000倍，称高频重组菌株。 ( 2)转移F因子频率低 2、2.Hfr形成 F因子整合到细菌环状DNA上，这种整合状态F＋菌株叫Hfr（高频重组）。 3、Hfr×F- (三)接合生殖和交换特点 1、接合生殖 供体细菌的DNA通过接合管进入受体细菌，实现基因重组的方式。 由于Hfr或F＋的DNA在转移过程