疟疾厚薄血膜的制做和染色方法课件.ppt

疟疾厚薄血膜的制做和染色方法 浙江省疾病预防控制中心 厚薄血膜的制做和染色方法一 载玻片的清洁二 玻片的执持方法三 刺血针四 取血的部位五 取血的适当时间六 厚薄血膜的位置七 厚薄血膜的血量、形状和大小八 厚薄血膜的涂制方法 取血的时间 间日疟：一般患者发作数小时至十余小时。 恶性疟：一般患者发作后20小时左右，此时环状滋养体发育至最高峰。初发时，一般需要在发作8日后才能在末梢血液中出现配子体。 厚薄血膜的位置形状和大小 将玻片划成三等分，厚血膜应位于靠右侧处，薄血膜从中间起至左格中部止。右端空格供记录姓名、编号或贴标签。 厚血膜 血量为5立方毫米左右（一小滴），自内向外回转扩大，涂成直径0.8-1.0厘米大小,厚薄均匀血膜。 薄血膜 薄血膜血量只需0.5-1.0立方毫米左右(约半颗粒大小），涂成舌状，长约3厘米，宽约2厘米。 吉氏染液配制法、染色 吉氏染剂粉 0.5克 甘油 25毫升 甲醇 25毫升 先用甲醇固定薄血膜，然后用2-5%吉氏染液，染色30分钟，水洗2-3分钟，镜检。 瑞氏染液配制法、染色 1、瑞氏染剂粉 0.1-0.5克 2、甘油 3毫升 3、甲醇 97毫升 用蜡笔在厚薄血膜之间划一道界限，再用滴管加瑞氏液5-8滴于薄血膜上，另加蒸馏水2-3滴于厚血膜上，经2分钟后，添加等量的蒸馏水(PH7.0)于薄血膜的染液中,用吸管和匀或倾侧摇匀,再引制厚血膜上,过约5至15分钟,待干镜检。未稀释的(未加入前的)染色液,切不可沾及厚血膜（因血红蛋白被酒精固定,致厚血膜呈不透明的污绿色而无法镜检)。 染色的 注意事项 1、染液的寿命与染色力的变异 2、染色时间与温度的关系 3、染液浓度与染色结果的关系 4、稀释液的PH与染色结果的关系 5、染液稀释后的使用时间 6、在进行大量血膜染色前，对染液的稀释度、PH 值和染色时间的长短是否适宜，应先用少数血膜进行染色测定。 7、镜油易使血膜褪色，所以镜检无盖片的血膜后，应用中性二甲苯完全洗掉血膜上的镜油。 薄血片中四种人体疟原虫主要鉴别要点 1、受染的红细胞大小、颜色。 2、环状体（小滋养体）体积、细胞质、细胞核。 3、大滋养体（色素颗粒、形状） 4、裂殖体（数目、排列、颗粒） 5、大、小配子体（形状、细胞核、细胞质、颗粒） 厚血膜疟原虫鉴别要点 1、早期滋养体（环状体） 2、晚期滋养体（大滋养体） 3、裂殖体 4、配子体 * * 间日疟原虫环状体 间日疟原虫滋养体 间日疟原虫配子体 间日疟原虫裂殖体 * * *