DNA分析常见问题及处理.pptVIP

Genecore ABI PRISM? 3700 DNA 分析仪 常见应用问题及处理 全自动 无需配胶 无需灌胶 Polymer in capillary is replenished automatically between runs 自动上样 Samples are automatically loaded into capillary by electrokinetic injection 自动分析数据 Simultaneous data collection and analysis DNA测序技术的应用领域 基因组计划 (未知序列测序) cDNA测序 (全长cDNA和EST) 杂合子测序 SNP分析 突变检测 基于测序的基因分型 电进样原理 毛细管和电极置于样品溶液中 加电压 荷-电的DNA进入毛细管并向毛细管另一端的+极泳动 进样量取决于片段的荷电量及片段大小 毛细管电泳对样品的要求 对样品纯度的要求比板胶电泳高 尽量去净： 残留的盐分 蛋白质 残留的去污剂(如SDS等) 残留的RNA 常用模板制备方法 质粒: 碱裂解法 有可能盐浓度高,伴有杂质 商业性试剂盒 Qiagen Prepman DNA纯度判定 UV分光范围: 0.25 ng / ?l OD260/OD280 = 1.8: