噬菌体展示技术及其在抗原表位筛选中的应用课件.pptVIP

噬菌体展示技术及其在抗原表位筛选中的应用 报告人：张瑞华 2010年11月 噬菌体 噬菌体是感染细菌、支原体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒，亦称细菌病毒。 噬菌体的结构简单，基因数较少，已成为分子生物学研究的重要工具；另外，因其还可作基因的载体，故又被广泛应用于遗传工程的研究。 噬菌体 Ph.D.由来 1985年，Smith首次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ，使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面，从而创建了该技术。 1988年Parmley发现已知抗原决定簇与PⅢ的N端融合在噬菌体表面后，可特异性地被抗体选中，因此提出了通过构建随机肽库了解抗体识别的抗原表位的设想。 1990年Scott将噬菌体随机多肽库成功应用于筛选抗原表位，之后国内外学者进行了大量的相关研究，有力地推动了病毒抗原表位的研究进程。 Ph.D.概念 噬菌体展示：将外源肽或蛋白与特定噬菌体衣壳蛋白融合并展示于噬菌体表面，进而通过筛选表达有目的肽或蛋白质的噬菌体，得到大量富集，然后通过DNA序列测定进行定性。 因此，噬菌体展示技术堪称表型与基因型的统一。外源蛋白或多肽的表型和基因型被统一在了同一噬菌体颗粒内，通过表型筛选就可以获得其编码基因。 Ph.D.系统类型 根据所用噬菌体类型的不同，又可