三基训练检验分册281-315 课件.pptx

《医学临床“三基”训练》 检验分册(第四版）基础理论、知识问答（281-315）;§5.2基础理论和基本知识问答 281.简述乳酸脱氢酶测定原理及注意事项。乳酸脱氢酶(I.DH)在辅酶I的递氢作用下,使乳酸脱氢而生成丙酮酸。 L一乳酸+NAD+#j丙酮酸+NADH+H+ NAD十还原成NADH,引起340nm处吸光度的改变,其吸光度的增加速率与标本中LDt{浓度成正比。此法适应全自动生化仪连续监测。;若无条件连续监测,可在反应后加入2,4一二硝基苯肼,与丙酮酸反应生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性环境中显棕红色。根据颜色深浅计算酶活力大小。 注意事项:①草酸、乙二胺四乙酸对本酶有抑制作用,故不宜使用。②红细胞中乳酸脱氢酶含量较血清中约高100倍,故应避免溶血,并及时分离血清。 ; 282.乳酸脱氢酶的顺向反应和逆向反应各有什么优点? 以乳酸为底物的反应称为顺向反应,以丙酮酸为底物的反应称为逆向反应。 (1)顺向反应的优点:①此法所需的氧化型辅酶I(NAD+)较逆向反应需用的还原性辅酶I(NlADH)稳定,易得纯品,含抑制I+DH的杂质少,价格也较低。②乳酸钠(或乳酸锂).底物比丙酮酸底物稳定。③过量乳酸对I.DH的抑制低于过量丙酮酸对LDH的抑制。 ; (2)逆向反应的优点:①NADI-{用量少,只是正向反应所用NAD+的3％。②酶反应速率也比乳酸盐法快,单位时间内吸光度的变化较大,能使用比较少的样品在较短的时间内进行测定。③酶活力随时间的线性关系较长。④用NADI-{或丙酮酸盐启动反应,其反应速度相同,而由乳酸盐到丙酮酸盐的反应中,I。DH活力取决于使用的启动剂。 ; 283.用lyr一谷氨酰一a一萘胺作基质测定|Ir—GT是根据什么原理?常用的显色剂有哪几种? y—GT‘作用于底物L一7氨酰一Q一萘胺,此底物既作为7一谷氨酰的供体,又作为受体,生成L一7一谷氨酰一L—y一谷氨酰一Q一萘胺和游离的Q一萘胺,后者与重氮化的对氨基苯磺酸反应,生成红色的偶氮化合物,色泽的深浅与酶活力成比例,与Q一萘胺标准液所显的颜色进行比较,可以求得样品中-),一GT的活力。 ; 酶促反应生成的Q一萘胺,除用重氮化对氨基苯磺酸显色外,还可用固蓝B显色,或将Q一萘胺重氮??后用N一萘基二氨基乙烯显色。 ;284.试述血清淀粉酶碘一淀粉比色法测定原理及注意事项。 血清(或血浆)中Q一淀粉酶催化淀粉分子中Q一1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有Q一1,6糖苷键支链的糊精。在有足够量基质的条件下,反应后加入的碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较其吸光度,从而推算出淀粉酶的活力单位。 ; 注意事项:①草酸盐、枸橼酸盐、EDTA.一Na2及氟化钠对淀粉酶活性有抑制,肝素无抑制作用。②酶活性在400U以下时与底物的水解量成线性,如测定管吸光度小于空白管吸光度一半时,应将血清量加大稀释倍数或减少血清加人量,测定结果乘稀释倍数。③本法亦适用于其他体液淀粉酶的测定。④唾液含高浓度淀粉酶,须防止混人。⑤淀粉溶液若出现混浊或絮状物,不能再使用。 ;285.试述血清淀粉酶酶法的测定原理。  葡萄脊6一磷酸+NADP-]一j堕塑奠生堕堕堕塑6一磷酸葡萄糖酸一NAD-.PH+H+ 在340nm处测定吸光度值的变化即可推算出AMS的浓度。 ; 286.何谓同工酶? 同工酶指在同种属生物、同一生物体、同一组织或器官,甚至同一细胞内具有相同催化活性,并以多种分子形式存在的酶。 .. ;287.反映肝细胞损伤的酶类有哪些7 . 反映肝细胞损伤的酶包括:转氨酶(包括AI。T和AST)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)、谷氨酸脱氢酶(G【.DH)、醇脱氢酶(ADH)、山梨醇脱氢酶(SDH)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(()CT)、鸟嘌呤脱氨酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAI.,)、·血清胆碱酯酶(CH E),卵磷脂一胆固醇转酰基酶(I.CAT)等。 ; 288.反映胆道梗阻的酶类有哪些? 反映胆道梗阻的酶类有碱性磷酸酶(AI。P)、氨肽酶、5’一核苷酸酶(5’NT)、.),一谷氨酰转肽酶(.),一GT)等。 ; 289.用于诊断心肌梗死的主要血清酶有几种? 主要有3种:AST、I.DH和CK以及它们的同工酶。 290.诊断胰腺疾病的主要血清酶有哪些? 主要有Q一淀粉酶和脂肪酶。Q一淀粉酶是诊断急性胰腺炎最常用的指标,一般在发病后2～12小时血清Q一淀粉酶活力开始上升,12～72小时达高峰,4天左右恢复正常。血清Q一淀粉酶升