7.溶瘤病毒治疗.pptVIP

溶瘤病毒治疗Oncolytic Virotherapy 基因治疗－进展与现状 肿瘤基因治疗 溶瘤病毒(Oncolytic Virus) General oncolytic virus theory and models Replication-competent viruses for cancer therapy 溶瘤病毒治疗－历史 溶瘤病毒－类型 Oncolytic viruses currently used in cancer clinical trials 溶瘤病毒－临床试验与效果 溶瘤病毒治疗－原理 溶瘤病毒的生物学特征 溶瘤病毒－优缺点比较 溶瘤病毒－Barrier 溶瘤病毒－RD 溶瘤病毒－Biosafety 溶瘤病毒治疗－问题与对策 溶瘤病毒治疗－靶向性策略 Four layers of specificity for retargeting viral tropism Strategies to improve oncolytic virus efficacy 腺病毒(Adenovirus) 腺病毒－分类 腺病毒－基因组 Evolution of Adenovectors 1st generation: E1- and E3 +/- 2nd generation: E1-, E2- or E4-, E3 +/- Generation X: E1A+, E1B-, E3 +/- Generation X.1: E1A and/or E1B conditional Generation X.2: helper dependent 腺病毒的优点 溶瘤腺病毒－Life Cycle 溶瘤腺病毒－原理 溶瘤腺病毒－基因组修饰 溶瘤腺病毒－实例 Onyx-015－临床试验 Adenoviral Retargeting 单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus) 疱疹病毒(Herpesvirus) HSV-1 －基因组 HSV-1－优越性 基因组长为152kb，容量大，可插入外源大片段； 宿主细胞范围广，可感染静息期和非静息期细胞，感染效率高； HSV-1的全部复制循环过程可在20小时内结束； HSV-1病毒颗粒既能通过细胞膜融合进行直接的细胞－细胞传播，也能通过细胞外空间进行传播； 临床上有多种抗HSV-1的药物用于治疗HSV-1的感染，安全机制好； HSV-1能有效感染多种实验动物，有利于建立动物模型； 可方便地制备和纯化高滴度的HSV重组体，没有野生型病毒体的污染。 HSV-1－生活周期 HSV-1－裂解循环的基因调控 HSV-1 －遗传操作 溶瘤HSV-1 溶瘤HSV-1－临床试验 Brainwel Hepawel 溶瘤HSV-1－靶向性改造 基因表达靶向(Therapeutic Gene Expression Targeting) 转录靶向(Transcriptional Targeting) 翻译靶向 (Translational Targeting) 病毒重靶向 (Virus Retargeting) 细胞转导靶向性 (Cell Transductional Targeting ) 免疫原性规避 hTERT的细胞表达特异性 hTERT基因的转录调控机制 真核生物mRNA的结构 Elements within untranslated regions (UTRs) that regulate translation Cellular Targeting 叶酸-叶酸受体介导的肿瘤靶向 叶酸偶联物 转导、转录、翻译靶向－ttoHSV HSV-1基因治疗载体系统  －多功能、通用型的BAC系统 Cre, Flp 和fC31 重组酶 pBeloBAC11 讨论题 什么是溶瘤病毒？溶瘤病毒为什么能溶瘤？ 溶瘤病毒治疗面临的最主要挑战是什么？ 溶瘤病毒包括哪些种类？溶瘤病毒都与肿瘤致病病毒相关吗？ 宿主范围广, 对人致病性低; 在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因; 能有效进行增殖，滴度高，可达1010到1011VP/ml，浓缩后可达1013VP/ml; 与人类基因同源，以人类细胞作为宿主，为人类蛋白进行准确的翻译后加工和适当的折叠提供了一个理想的环境; 不整合到染色体中，无插入致突变性; 能在悬浮培养液中扩增，适合大规模培养增殖; 容量较大，能同时表达多个基因. THE LANCET Oncology, 2000;1:148-158 Exp. Opin. Biol. Ther. (2001) 1(3):525-538 G1 S THE LANCET Oncology, 2000;1:148-158 Cancer Gene Therapy (2004) 11, 643–66