外源Hpa110—42基因导入对小麦农艺性状和籽粒品质影响.docVIP

外源Hpa110—42基因导入对小麦农艺性状和籽粒品质影响 　　摘 要：以4个抗性较强的转Hpa110-42基因小麦株系和扬麦16（YM16）为试验材料，对其株高、穗下节间长度、旗叶长宽、穗长、小穗数和千粒重等农艺性状和籽粒中淀粉、蛋白质含量等品质性状进行了测定，以探讨外源基因的导入对小麦主要农艺性状和品质性状的影响。结果表明，与对照相比，转基因各株系的株高显著降低，小穗数和千粒重显著上升，而穗下节间长和旗叶宽无显著差异；4个转基因株系中，2个株系的直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量高于YM16，1个株系的含量与受体无显著差异；而所有转基因株系的蛋白质含量与对照也无显著差异。这表明外源Hpa110-42基因的插入对小麦的部分农艺性状和品质性状产生了一定影响。 　　关键词：转基因小麦；农艺性状；淀粉含量；蛋白质含量 　　中图分类号：S512.101文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）09-0019-04 　　转基因技术已成为作物品种改良的一个重要手段，自1992年第一株转基因小麦诞生以来，转基因技术在提高小麦抗病虫、抗逆性、改善品质和雄性不育利用等方面展示出良好的应用前景。但是，外源基因导入后在植物基因组中的随机整合及其在细胞中的拷贝数均会影响转基因植株的表型性状和遗传稳定性[1]。除能获得目的基因控制的性状外，转基因后代的其它性状也可能发生不同程度的变化，这种现象在转基因植物中较普遍[2]。目前，对于小麦中外源基因Hpa110-42的遗传规律、遗传稳定性和表达稳定性等方面的研究报道较少，关于其对农艺性状的研究尚未见报道。 　　Harpins是植物革兰氏阴性病原菌产生的一类蛋白激发子，在植物中可以通过启动不同信号传导通路诱导植物抗病虫、抗旱和促进植物生长等多种有益效应[3，4]。Chen等[5]对水稻条斑病菌的一个Harpin蛋白HpaGXooc的9个功能片段进行了深入研究，结果表明，功能性片段HpaG10-42对水稻防卫反应基因和生长相关基因的诱导活性明显强于HpaGXooc蛋白全长，对水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）的抗性诱导效应和促进水稻的生长效应也是最强的。南京农业大学董汉松课题组将编码HpaG10-42蛋白片段的Hpa110-42基因利用基因枪法导入小麦栽培品种扬麦16中，并获得了转基因材料。本课题对转Hpa110-42基因小麦T1、T2代植株进行了PCR、Southern blotting、RT-PCR等分子检测和抗蚜性鉴定，筛选出了抗性较强的转基因株系。 　　本试验主要研究了4个转Hpa110-42基因T2代抗性植株及对照的株高、穗下节间长度、旗叶长宽、穗长、小穗数、千粒重等主要农艺性状和直链淀粉、支链淀粉、总淀粉和蛋白质含量等品质性状，旨在探讨外源Hpa110-42基因的导入对小麦农艺性状和品质性状的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　扬麦16（YM16）和转Hpa110-42基因小麦T1代杂合种子由南京农业大学植物保护学院董汉松教授提供，转基因T2及T3代种子由本实验室繁育并保存。本课题组通过前期的分子鉴定和生物抗性鉴定，得到4个抗蚜性较强的T2代转基因株系（T2-9、T2-17、T2-45和T2-48），并单株收获其T3代籽粒。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 主要农艺性状的调查 对YM16和各转基因株系进行了农艺性状的调查，主要包括株高、穗下节间长度、旗叶长宽、穗长、小穗数、穗密度、千粒重。 　　株高：测量每株地面到穗顶（不含芒）的长度； 　　穗下节间长：测量穗基部节至旗叶叶鞘基部着生节的长度； 　　旗叶长和宽：测量旗叶长度和最大宽度； 　　穗长：主穗基部小穗节至顶端（不含芒）的长度； 　　小穗数：调查其主茎穗的小穗数； 　　穗密度：麦穗上总小穗数除以穗长； 　　千粒重：每株系随机选取8株，调查单株总粒数并全部称重，再换算出千粒重。 　　1.2.2 籽粒品质特性的测定 每个转基因株系中随机选取8个单株的T3代籽粒，高速振荡器粉碎，保证全成分均能通过60目筛。参照何照范[6]的双波长法，测定籽粒中直链及支链淀粉含量，并计算出总淀粉含量（总淀粉含量为直链淀粉和支链淀粉含量总和）。按中华人民共和国国家标准《谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法（半微量凯氏法）》（GB 2905-82，即NY/T3-1982）进行粗蛋白分析，全氮含量乘以5.7即为籽粒蛋白质含量。 　　1.3 数据统计分析 　　采用Microsoft Excel 2003软件进行数据整理，DPS v 7.05软件进行差异显著性分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 外源Hpa110-42基因的导入对农艺性状的影响 　　4个转