肝病与肝癌中EGFR、MMP2、MMP9表达及比较.ppt

* 肝病与肝癌中EGFR、MMP2、MMP9表达及比较 曹晓蕾 陈莉 原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)是危害人类健康的常见肿瘤，尽管对其发生、发展、演化过程进行了大量的研究，但其发生机制尚未明了。对EGFR、MMP2、MMP9在肝癌发生发展中的作用尚未见报道。为此，本文采用免疫组化方法，检测比较在慢性肝病与肝癌中EGFR、MMP2、MMP9的表达，探讨其意义。 1.材料与方法 1.1材料：取南通医学院附属医院及周围市医院肝病蜡块标本47例，其中肝癌标本26例、慢性肝病(chronic hepatic disease,CHD)标本21例（包括肝炎、肝硬化）。连续切片4μm厚，贴于APES处理的载玻片上。EGFR、MMP2、MMP9及免疫组化试剂盒购于北京中山生物试剂公司。 1.2方法： ⑴HE染色切片病理观察，双盲法进行病理诊断。 ⑵免疫组织化学（SP法）检测EGFR、MMP2、MMP9在肝炎、肝硬化、肝癌组织中的表达。使用抗体为EGFR(Santa cruz Biotechnology Inc),工作浓度1：100;鼠抗人MMP9单克隆抗体（2M-0335）, 工作浓度1:50; 鼠抗人MMP2单克隆抗体(2M-0330), 工作浓度1:50。EGFR染色过程中使用胃蛋白酶消化，所有免疫组化切片经DAB染色，苏木素轻微复染。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替第一抗体作为阴性对照。 1.3判断标准： EGFR阳性定位于肝实质细胞胞浆中，呈棕黄色；MMP2、MMP9阳性定位于胞浆中，呈棕黄色，可见于肝癌细胞、间质Ito细胞、再生肝细胞、新生胆管细胞中。 1.4统计学处理：用x2检验，P值取小于0.05作判断差异显著标准。 2.结果 2.1 EGFR、MMP2、MMP9在CHD、PHC中的表达特征 EGFR在CHD中仅有较弱表达，阳性率仅为28.57%(4/21) ；在PHC中呈异质性表达，阳性率为73.08%(19/26)，并且呈较强表达。MMP2在CHD中呈较强表达，阳性率为76.19%(16/21) ； MMP2在PHC中呈较强表达，阳性率为80.77%(21/26) 。MMP9在CHD中有较弱表达, 阳性率为52.38%(11/21) ， MMP9在PHC中呈较强表达，阳性率为80.77%(21/26) 。 2.2 EGFR 、MMP2、 MMP9在PHC和CHD中的比较（表1） 表1 EGFR、MMP2、MMP9在PHC和CHD中表达的比较 由表1可见， EGFR在PHC中表达的阳性率显著高于CHD中（x2=9.24，P0.01）；MMP9在PHC中表达的阳性率显著高于CHD中（x2=4.31，P0.05）；MMP2在PHC和CHD中表达的阳性率无显著差异（x2=0.15，P0.05）。 2.3PHC中EGFR、MMP2、MMP9三者表达的比较 2.3.1 26例PHC中MMP2、MMP9表达阳性病例完全一致，即当PHC病例MMP2阳性时，MMP9亦呈阳性，26例PHC中MMP2、MMP9阳性21例，占80.77%；阴性5例，占19.23%。 2.3.2 PHC中MMP2、MMP9与EGFR表达的比较（表2） 表2 PHC中MMP2、MMP9与EGFR表达的比较 由表2可见，PHC中MMP2、MMP9与EGFR表达无显著差异（x2=0.538，P0.05）。 2.4CHD中EGFR、 MMP2、 MMP9三者表达的比较 2.4.1CHD中MMP2、MMP9表达的比较（表3） 由表3可见，CHD中MMP2、MMP9表达无显著差异(P0.05) 2.4.2CHD中EGFR与MMP2、MMP9表达的比较（表4） 由表4可见，CHD中EGFR表达增高时，MMP2、MMP9表达减少，而EGFR表达阴性中有较多MMP2、MMP9表达，差异显著(P0.05) *