《微生物实验室培养》课件-(新人教版选修1).pptVIP

牛肉膏 蛋白胨 四. 实验操作---大肠杆菌的纯化培养 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算－称量－溶化－灭菌－倒平板 （二）纯化大肠杆菌 最常用的方法： 平板划线法和稀释涂布平板法 结果分析与评价 课题延伸 平板划线的操作方法 平板划线法 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 稀释涂布平板法 涂布器 * 微生物 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 　　是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 一、微生物 特点：小 简 低 病毒的结构 病毒 病 毒 SARS冠状病毒、 禽流感病毒 朊病毒（蛋白质病毒） 吸附 注入 合成 释放 组装 病毒的增殖 病毒的增殖一般可分五个阶段，即： 吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放 病毒的营养方式 ：寄生 细菌的外形与大小 细菌 A. 球菌 B. 杆菌 C. 弧菌 常见的细菌三种典型形态 A B C 细菌的结构 　　芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 　　芽孢又小又轻，可以随风飘散。 　　当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。 芽孢：细菌形成的 椭圆形的休眠体 菌　落 　　单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 　　菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落 细菌的菌落特征因种而异 放线菌 ⑴结构： 　单细胞原核生物 　分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝） （2）繁殖 孢子丝| 孢子 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的 ⑶应用: 真菌 酵母菌 酵母菌和霉菌 青霉 生 殖 腐生生活 孢子生殖 微生物的实验室培养条件： （1）合适的营养和环境条件 （2）确保其他微生物无法混入 二. 培养基 1. 概念： 按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 液体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 2.类型及应用： 常用于工业生产 用于微生物的分离、鉴定、计数 加琼脂 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 培养、分离出特定微生物 鉴别不同种类的微生物 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成。 加入高浓度食盐的培养基: 不加氮源的无氮培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 加入青霉素等抗生素的培养基: 选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离金黄色葡萄球菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽,可以用来鉴别大肠杆菌 鉴别培养基 大肠杆菌 碳源 氮源 无机盐 水 3.营养要素 还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基)  　 牛肉膏当中含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素等物质。该产品广泛应用于生物制药发酵及各种培养基的制备。 牛肉膏是采用新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。 不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在着各种蛋白胨，一般来说，用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白（肉类）和植物蛋白（豆类）等两种。 蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。它可以作为微生物培养基的主要原料。 三.无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 吸管、培养皿等 160~170℃、1～2h 接种环、接种针等 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 方法 定义 灭菌 消毒 较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部的部分微生物 （不包括芽孢、孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。 （包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸