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生命科學實驗(三)植物組織培養
根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 植物組織培養 豬籠草 密閉空間! 組培原理 植物細胞具有 ”分化全能性” 再生能力 分化全能性(totipotency) 細胞細胞核具有完整基因組,給予適當誘導條件(如荷爾蒙濃度、比例),使具有再生為新個體之能力,稱之。 組培定義 將植物體之一部份與母體分離,在適當條件之 無菌狀態下加以培養,使其繁殖之一種技術。 消毒 初步修飾 消毒 修飾 接種 完整 植株 清洗 無菌培養之建立 消毒 初代培養 繼代培養 組織培養流程 Plant Tissue Culture--- 材料部位及目的 植物體培養或全體培養 胚培養 器官培養 組織培養或癒傷組織培養 細胞培養 培養條件 培養條件 供給的養分---培養基 Murashige&Skoog(1962)開發完整人工培養基 - MS medium 培養的環境 培養基主要成分: 1.無機鹽類 2.碳源 3.維生素 4.生長調節劑 5.有機添加物 6.水 7.洋菜粉 培養基主要成分 1.無機鹽類 包括氮、磷、鉀…等大量元素及微量元素(I,B,Mn,Zn,Mo,Cu及Co),可用花寶1號或2號(3克/升)來取代。 2.碳源 蔗糖、葡萄糖。 濃度為2﹪~4﹪;20克/升~40克/升。 一般培養利用台糖食用糖即可。 3.維生素 (Vitamins) Thiamine(維他命B1)為必需,另添加Pyridoxine(維他命B6),Nicotinic acid(菸鹼酸),myo-inositol(肌醇)可促進細胞生長。 4.生長調節劑 NAA,2.4-D(10-7~5×10-5M) Kinetin,BA(10-7~10-5M) 5.有機添加物 酵母抽出物、麥芽抽出物、椰子汁、果汁(蕃茄、香蕉、蘋果)或馬鈴薯。 6.水 蒸餾水最佳 7.洋菜粉 8~10克/升 培養基配置---MS 培養條件 供給的養分---培養基 培養的環境 培養環境 溫度:低於15℃生長緩慢,25℃最適,避免超過35℃ 光照:每日12~16小時光照 光度:一般日光燈亦可 濕度:除濕機 滅菌及無菌操作 移植材料以化學藥品消毒 培養基,培養器皿及解剖工具以高壓滅菌釜消毒(121℃、1.1 Kg/cm2,20~40分鐘) 移植操作空間:無菌操作台或無菌室 組織培養的應用 生產無病毒的種苗 迅速的繁殖種苗 優良品種的保存 生理學、遺傳學、藥學、園藝學等等的應用 生理學上之應用: 利用組織培養方法研究 植物生理代謝過程有下列好處: 無菌 實驗材料單純 物質吸收快速 無季節性限制 馴化 V.S健化 健化:強光、高糖或低濃度無機鹽類 (出瓶前) 馴化:弱光,緩慢使植株適應外界濕度 (出瓶後) 消毒 Plant tissue culture 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 根据三原色原理叠加后的单色形成了第三种颜色并脱离了原本的单色颜色更加丰富象征着产品在原有空间的组合中产生了突破性的变化 人工環境 * 1.分化全能性~~~啥米叫分化 2.型態雙極性~~~~為了維持完整生存個體能夠自動形成缺失器官之能力EX:根生莖(地瓜)、莖生根(黃金葛) 1+2 ~~~~一棵植株 * 好處跟壞處~ 木本植物 價位高植物~ * Cycle 大量繁殖與母本一樣的植株 * 大量元素微量元素 光合作用少 合成慢 錦上添花 * Murashige&Skoog(1962)開發完整人工培養基(synthetic medium) * 冷氣一機二用 光 / 暗週期為14 / 10 小時 * 滅菌釜 無菌操作台 *
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