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HPV18型病毒绝对定量检测方法建立 　　HPV DNA 整合入宿主基因组被认为发生于宫颈癌发展的早期阶段，也是宫颈病变恶性转化的重要因素[7]。在整合过程中，HPV E2和L1基因片段断裂或丢失，癌基因E6/7或E7片段整合入宿主基因组脆性部位的到稳定表达，并引起细胞特定基因功能紊乱，或激活或下调，这一机制已成为高危型HPV相关恶性肿瘤发病机制的一个主要诱因。据研究发现，高危型HPV16、18和58型在宫颈癌和食管癌中的整合率较高[4]，因此我们本次选用HPV18E6/7基因作为PCR扩增的靶基因能大大提高检测的灵敏性。为进一步探明HPV18在宫颈癌中的感染病毒含量，本研究首先通过构建HPV18型E6/7的标准品，采用实时定量PCR法绘制标准曲线，通过换算建立HPV18型的感染量的预测模型，为研究妇女宫颈癌中HPV18的感染状态提供了可靠的方法。我们发现HPV18 E6/7标准曲线相关系数及相关性均较好，说明构建质粒可以作为标准品应用于病毒含量和整合的检测。 　　虽然，目前对于高危HPV的病毒负载量，整合状态与宫颈癌及癌前病变的严重程度之间的关系，以及HPV与宿主基因组的整合是否为宫颈癌病变的必要因素仍有部分争议。甚至有学者因此认为在高危型HPV，特别是HPV16型导致的宫颈癌发生发展过程中 HPV 整合并非一个至关重要的因素。但综合越来越多的研究结果，我们可以初步得出高病毒负载可导致病毒复制及支持病毒持续存在，抑制机体的免疫反应，从而减少病毒清除和细胞学转归的机会[8]，因此，高病毒负载和大量癌基因整合入宿主基因组更易造成持续和反复感染。 　　高危型HPV 在宫颈癌发病机制中的重要性使HPV 疫苗研究日益受到重视。因此建立高危型HPV病毒含量稳定而有效的监测方法，将有利于预测宫颈癌前病变的转归和提高宫颈癌筛查的准确性，为宫颈癌的早期诊断、早期治疗、预后评估及疾病预防提供更为有力的实验室证据。 　　参考文献： 　　[1] Parkin DM. Global cancer statistics in the year 2000 [J]. Lancet Oncol. 2001， 2（9）： 533-43. 　　[2] 乔友林.中国妇女人乳头瘤病毒感染和子宫颈癌的流行病学研究现状及其疫苗预防前景[J].中华流行病学杂志，2007，28（10）：937-940. 　　[3] 张东红， 林美珊. 人乳头瘤病毒??国人宫颈病变中感染及型别分布特征的 Met a分析. 中国全科医学，2012，13（12）： 1287-1290. 　　[4] Zhang D， Zhang Q， Zhou L， et al. Comparison of prevalence， viral load， physical status and expression of human papillomavirus-16， -18 and -58 in esophageal and cervical cancer： a case-control study [J]. BMC Cancer. 2010， 26（10）：650. 　　[5] Josefsson AM， Magnusson PK， Ylitalo N， et al. Viral load of human papillomavirus16 as a determinant for development of cervical carcinoma in situ： a nested case-control study [J] . Lancet， 2000， 355（ 9222） ： 2189- 93. 　　[6] Nagao S， Yoshinouchi M， Miyagi Y， et al. Rapid and sensitive detection of physical status of human papillomavirus type 16 DNA by quantitative real-time PCR [J]. Clin Micmbiol， 2002， 40 （3）： 863～867. 　　[7] Hamid NA， Brown C， Gaston K. The regulation of cell proliferation by the papillomavirus early proteins [J]. Cell Mol Life Sci. 2009， 66（10）：1700-17. 　　[8] Moberg M， Gustavsson I， Wilander E， et al. High viral loads of human papillomavi