流行性感冒病Vero细胞繁殖研究毕业论文.doc

摘 要 流感是由甲(A)、乙(B)、丙(C)三型流感病毒分别引起的一种急性呼吸道传染病。三个流感类型反映了对人类危害程度的顺序，其重要性在于可引起严重的发病率和死亡率，影响学校、公共服务机构和各单位的正常工作。 目前研究应用于灭活流感疫苗生产的细胞系主要有MDCK、VERO、PER.C6三个细胞系。其中Vero传代细胞系解决了外源病毒和致癌性的问题，且易于大规模培养，被WHO推荐作为疫苗生产细胞基质之一，使用哺乳动物细胞培养技术替代鸡胚来生产流感疫苗将是大势所趋。 基于上述情况，通过广泛的文献检索与反复试验，本文研究了各(亚)型流感病毒于Vero细胞内的快速传代，流感病毒于细胞内传代稳定性问题，为进一步研制Vero细胞培养流感的病毒疫苗提供一定的参考。 关键词：流行性感冒病毒；Vero细胞；繁殖 BSTRACT Influenza caused by influenza virus type A、B、C,is important as acause of severe morbidity and mortality that disrupts work in schools，the public services and elsewhere. Duringmajorepidemics many people require medical treatment or hospitalization.Excess mortality often accompanies influenza epidemics，Since they constitute the most rapidly increasing sector of the populations of many countries-projections show that their numbers are likely to double by early in the next century-the epidemiology of influenza can be expected to change accordingly. At present,the cells,including MDCK、Vero、PER.C6 are recommended as cell substance of Influenza Virus Vaccine(Inactivated) production by WHO.And Vero cell line has been successfully used for Rabies、IPV、PIV vaccines production. According to the reports of some literatures and the results from large amounts of test，this dissertation has accomplished the major technics of rapidly cultivating Influenza virus in Vero cell and the seed lot system for Influenza Virus Vaccine（Inactivated，Vero Cell)production.Above all， this paper is provide the foundation of further researching Influenza VirusVaccine(Inactivated，Vero Cell). Key word：Influenza virus；Vero cell line；culture。 第一章 绪论 1.1流感概述 流感是一种严重威胁人类健康的世界范围流行的呼吸道传染病， 其流行病学历史可追踪到12世纪,从文献记载推测1510年可能就有过世界性大流行，尽管1580年已有详细的描述，但人们普遍认为1889-1892年间的流行病学资料更可信 并且有回顾性的病原学证据为甲型流感病毒(A/H2N2)。 特别是1918年意大利流感,估计全世界死于流感的人数达4000-5000万,有关资料还显示人群病死率上升与流感的流行季节相关 ，在美国每年因流感住院人数多于100000人，死亡近40000人， 尽管引起流感流行 ，特别是大流行的机制还不十分清楚 ，但较一致的看法是与流感病毒表面抗原变异和人群普遍缺少免疫力有关。据了解，1977年5月首发于我国东北地区的流感是由H1N1亚型流感病毒引起的，一年后波及全球。H1N1亚型毒株的重现，造成人流感流行史上罕见的在人群中同时流行着两个亚型（H1N1和H3N2）毒株的局面