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高中生物第3章细胞工程第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养技术与单克鹿体技同步备课课件北师大版选修3
过程 细胞A、B ↓去壁 原生质体A、B ↓融合 融合的原生质体 ↓ 杂种细胞 ↓植物组织培养 杂种植株 细胞A、B ↓融合 杂交细胞 ↓有丝分裂 多个相同杂交细胞 ? 相关酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶或胶原纤维酶 第1课时 动物细胞培养技术与单克隆抗体技术 第3章 第2节 动物细胞工程 目标导读 1.结合教材P53~55图文,掌握哺乳动物细胞培养条件和流程。 2.分析教材P55图3-14,理解动物细胞融合技术。 3.单克隆抗体的制备过程。 重难点击 1.动物细胞培养条件和流程。 2.单克隆抗体的制备过程。 课堂导入 1970年,有两位科学家做了人—鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的流动性。思考该如何实现人—鼠细胞的融合,动物细胞融合后还有什么用途呢?植物体细胞杂交可得到杂种植株,动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗? 一、哺乳动物细胞培养技术 二、动物细胞融合与单克隆抗体技术 内容索引 当堂检测 一、哺乳动物细胞培养技术 1.动物细胞培养条件 (1)培养基状态和成分: 培养基,成分主要包括葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 等。 液体 动物血清 基础梳理 动物细胞进行培养时通常要添加动物血清的原因有两点:一是补充合成培养基中不足的营养物质;二是为动物细胞提供与内环境相似的生活环境。 小贴士 (2)气体环境:需要足够的 和一定的二氧化碳。二氧化碳具有调节 的作用。 (3)温度和pH:培养温度要与 温度保持一致;培养基的适宜pH为 。 氧气 培养液pH 动物体内 7.2~7.4 2.动物细胞培养流程 (1)取材:取动物的 或幼龄动物的组织或器官剪碎,加入适量_____ 使细胞分散。 (2)原代培养:经过滤、 后将动物细胞接种到 的培养液中,在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养,称为原代培养。 ①贴壁生长:悬液的细胞贴附在培养瓶的表面,开始 分裂,其数目以 增长的方式增多。 ②接触抑制:贴壁细胞分裂铺满培养瓶的整个表面,细胞 时,细胞分裂停止。 胚胎 胰蛋 白酶或胶原纤维酶 离心 无菌 有丝 指数 相互接触 (3)传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖,即为传代培养。 ①细胞生长到 代左右时,出现生长停滞,大部分细胞 。 ②极少部分细胞可以传到 代,遗传物质 (填“有”或“没有”)发生改变。 ③有些细胞(如肿瘤细胞) 发生了改变,可以无限制的传代下去。 10 衰老死亡 40~50 没有 遗传物质 问题探究 结合动物细胞培养的过程分析下列问题: 1.为什么要取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官细胞进行细胞培养? 答案 这类细胞具有较强的分裂能力,容易培养。 答案 2.培养过程中两次使用胰蛋白酶,目的有何不同? 答案 第一次是将组织分散成单个细胞,第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞。 3.能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗? 答案 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性。 答案 4.动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境? 答案 离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力,一旦受到污染或自身代谢物质积累等,培养的细胞就会死亡。 解析 动物细胞培养需要在无菌条件下进行,培养前要用胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散。动物细胞培养利用了细胞有丝分裂的原理,主要目的是获得大量的具有相同遗传特性的细胞。细胞传代培养至50代以后,遗传物质可能发生改变。 拓展应用 1.有关动物细胞培养的叙述中,正确的是 A.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 B.动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白 C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散 答案 解析 2.下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较中,叙述错误的是 A.所用的培养基的成分基本相同 B.植物组织培养的结果是培育成植株,动物细胞培养的结果是培育成很 多细胞 C.植物组织培养的目的是为了快速繁殖和获得无病毒的植株,动物细胞 培养的目的是为了获得细胞产物或杂交细胞 D.植物组织培养的原理是细胞的全能性,动物细胞培养的原理是细胞的 增殖 答案 解析 解析 动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,另外还有动物血清等。植物组织培养所用的
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