正交设计多糖提取_实验方案.docVIP

多糖 正交实验方案 基本提取工艺流程： 黄精、百合干燥粉碎——石油醚脱脂2次——加水热提——提取液过滤——水浴浓缩——离心取上清——加入Sevag试剂脱蛋白操作——取上层水层——加无水乙醇沉淀——收集沉淀——用水溶解——过滤除杂质——重复1次醇沉——收集沉淀——加水溶解定容——成为贮备液。 精密量取贮备液——加水稀释定容——供测多糖含量。 精密量取贮备液——置锥形瓶水浴蒸干——干燥3h——冷却后——称重，计算浸膏得率。 一、提取过程的正交方案： 1、称取黄精、百合各10g干燥至恒重——粉碎成粗粉（过筛）——（置于圆底烧瓶中）加入5倍量（100ml）石油醚——水浴50℃加热回流1h，共2次，进行脱脂及除去小分子糖——弃液留渣，药渣晾干（置于培养皿中于通风处过夜晾干，或置于圆底烧瓶中水浴上加热至能轻松倒出）——（按照正交设计表的要求）加适量蒸馏水，于适宜温度，水浴加热回流提取规定次数——合并提取液—减压抽滤——水浴——浓缩（90℃）——至固定量30ml（浓缩过量时补足体积）——4000r/min离心10min——（注射器抽取）取上清液 2、——置于锥形瓶中——加入Sevag试剂（氯仿：正丁醇=5:1）约等量——置于恒温水浴振荡器50℃振荡15min——改置于分液漏斗中静置20min以上——待其分层后，取最上层（从上口倒出） ——重复操作2次——置于广口瓶，加醇处理，加入4倍量的无水乙醇