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实验室生物安全与生物安全柜在临床中的合理使用 　　Yuan-li Mao ??? 随着人们对感染性疾病危害性认识的不断加深，特别是经过2003年和2004年SARS在多个国家的流行及通过实验室感染，使生物安全成为重要的国际热点问题。本文将对实验室生物安全水平以及如何合理配置、使用生物安全柜作一介绍。 ???一、?微生物风险度评估 ?? 微生物种类繁多，包括真菌、细菌、放线菌、病毒、立克次体、螺旋体、支原体衣原体等类群，其中能引起人类疾病的通称为病原性微生物。病原性微生物按危险程度分为四组： ??? 1 类风险组，指对个体和社会无危险或危险性较低的微生物； ??? 2 类风险组，指对人或环境具有中等潜在危害的微生物；即某种病原体，能引起人类或动物疾病，但对实验室人员、社会、牲畜或环境不太可能具有严重的危险性，实验室暴露可能引起严重感染，但具有有效的治疗方法及预防措施，并且感染的传播性有限。 ??? 3 类风险组，主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗和治疗药物；某种病原体，通常能引起严重的人类或动物疾病，但一般不会从一个个体传染给他人，具有有效的治疗方法及预防措施。 ??? 4 类风险组，对人体和环境具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。 ???二、生物安全实验室的分类、分级及适用范围 ??? 一般说来，生物安全实验室分为如下四个级别： ????1．?生物安全1级实验室（BSL-1） ??? 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。 ??? 2．?生物安全2级实验室（BSL-2） ??? 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 ??? 3．?生物安全3级实验室（BSL-3） ??? 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗和治疗药物。 ??? 4．?生物安全4级实验室（BSL-4） ??? 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。 ??? 值得特别注意的是，当出现新型不明微生物时，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。 ????三、?生物安全柜 ???? 1．?定义 ???? 生物安全柜是用于实验室的主要隔离设备，可以防止有害悬浮微粒的扩散，对实验者、实验物和环境提供保护，安全应用于对高危险微生物、有毒物质和放射寡核苷酸的操作。 ???? 2．?生物安全柜按照NSF49标准分类 ???? A、?B1、B2、B3四个类型。 ??? A型：70%气体循环，30%气体排放室内； ??? B1型：30%气体循环，70%气体由管道排放至废气通道； ??? B2型：0%气体循环，100%气体由管道排放至废气通道； ??? B3型：70%气体循环，30%气体由管道排放至废气通道。 ??? 3．?生物安全柜根据表面风速的不同，又可分为I级、II级和Ⅲ级。 表1? I级、II级和Ⅲ级生物安全柜的区别 ? BSC 表面风速（m/s） %气流 排风系统 再循环 排出 I级 0.36 0 100 硬管道 II级A1型 0.38-0.51 70 30 排到室内或套管式的连接 向室外排风的II级A2型 0.51 70 30 排到室内或套管式的连接 II级B1型 0.51 30 70 硬管道 II级B2型 0.51 0 100 硬管道 Ⅲ级 NA 0 100 硬管道 ? ??四、生物安全柜的选择 ? ?? 选择生物安全柜选择原则要根据保护类型的需要，即： ? ?? 1．?只对人员进行保护； ???2．?同时对人员、产品和环境进行保护； ???3．?对人员的保护程度。 ?? 其中，对人员的保护程度是指微生物危险组1到危险组4的程度以及生物实验室的安全程度。表2表3列出了何种BSC被推荐用于何种保护以及各级生物安全水平实验室对应的生物安全柜不同级别配置。 表2? 根据保护类型的需要选择适宜的生物安全柜 ? ? 保护类型 BSC的选择 针对危险组1-3微生物的人员保护 I级、II级、Ⅲ级 针对危险组4微生物的人员保护、手套箱实验室 Ⅲ级 针对危险组4微生物的人员保护、防护服实验室 I级、II级 产品保护 II级，仅当涉及层流时用Ⅲ级 针对微量的不稳定的放射性核/化学药品的保护 II级B1，向室外排风的II级A2 针对不稳定的放射性核/化学药品