菇类多醣体制剂研发与应用.docVIP

- PAGE 5 - 菇類多醣體製劑的研發與應用 一、前言 菇類被用作中藥材，在中國已有悠久的歷史，早在兩千多年前，中國第一部本草著作「神農本草經」問世，其中即詳述六芝（青芝、赤芝、黃芝、白芝、黑芝、紫芝）、茯苓、豬苓、五木耳、雷丸等藥用菇類的形態、性味和功用。至今，菇類不但是眾多中草藥中極重要的天然藥物資源，且已成為當今探索和發掘抗癌藥物的重要研究課題。西元1968年，池川氏(Ikekawa)等人從雲芝、樹舌、松杉靈芝、香菇、金針菇、松茸、木耳等27種菇類經熱水浸煮後的萃取物，針對患有Sarcoma 180的小白鼠進行抗腫瘤活性試驗，發現幾乎所有菇類的熱水萃取液都有很高的腫瘤抑制率和腫瘤完全退縮率，顯示有顯著的宿主仲介性（host-mediated）抗腫瘤活性 (表一)。自此之後，相當多的學者相繼投入菇類的抗腫瘤研究工作，並分離出有效抗腫瘤成分主體，確認它是酸水解後僅生成D-葡萄糖的一種多醣類：β–D–葡聚醣（glucan）。目前在日本，已有雲芝經液體培養後的菌絲以熱水提取的抽出液krestin（簡稱PSK）、香菇子實體多醣lentinan、和裂褶菌經液體培養後的胞外多醣schizophyllan等三種從菇菌生產的多醣體抗腫瘤製劑(表二)上市，並有多篇文獻證實這三種菇類多醣體製劑具有改善癌症病人臨床症狀之輔助治療效果。有鑑於此，本文將詳述雲芝素、香菇多醣和裂褶菌多醣的研發過程和應用範圍，期待能從這三種多醣體製劑的研發歷史，找出未來菇類保健食品的可能開發方向。 二、雲芝素的研發與應用 雲芝素(krestin)或稱PSK (polysaccharide K)，為吳羽(Kureha)化學工業與三共(Sankyo)公司製造、上市的多醣類抗腫瘤製劑。本製劑是選用雲芝 [Trametes versicolor (Fr.) Quel.] CM101 菌株以液體發酵培養產生的菌絲體 (圖一)，經由熱水抽出、飽和硫酸銨沈澱、脫鹽等程序製成的。它並非單一物質，而是一連串的多醣及「多醣－蛋白質」複合體的混合物，其中多醣佔62-80 %，蛋白質佔20-38 %。製劑型式為袋裝(sack)，內含1克的雲芝素褐色粉末。它可溶於水，但不溶於甲醇、氯仿、苯、己烷等有機溶劑。以離心法測定之平均分子量為9.4×104。 在雲芝多醣尚未上市之前，雲芝子實體就已是中國和日本常用之民俗用藥。1965年，日本賀知縣一位晚期胃癌患者，在絕望中服用雲芝熱水煎煮汁後，竟意外的完全康復了。在這樣的民間神奇療效流傳下，日本開始針對200餘株擔子菌的子實體和液體培養菌絲體，測試以上菌株對Sarcoma 180等腫瘤細胞的抗腫瘤活性，發現多株多孔菌科的菌種有顯著之活性。之後根據這些菌株測試口服用藥的抗腫瘤效果、菌種繼代培養時各種性質的穩定性等評估因素，認為以雲芝培養菌絲體的熱水提取液最具開發價值，並進一步對此提取液進行多項基礎和臨床研究，確認它對各種消化器官癌症、肺癌和乳癌的治療效果後，終於在1977年5月以雲芝素的名稱，以抗腫瘤藥物的名義在日本核准上市。 有關雲芝素產品研發的文獻雖然不易收集，但仍可從現有的相關專利文獻中明瞭當初的研發構想和可能的商品化流程。例如Hotta等人的專利 (US patent No.4289688，1981, 吳羽化學工業公司)中即提到利用雲芝菌絲體提取有效抗腫瘤物質的方法： 1.菌株編號：CM-101。 2.培養條件：5%葡萄糖、0.2%蛋白月東 (peptone)、0.3%酵母抽出物、0.1% KH2PO4、0.1% MgSO4?7H2O，30ml培養液／200ml三角瓶、25-27℃、靜置培養10天。培養完後以長在液面上的菌絲團當作種菌，加入含200ml培養基組成如上所述之培養液的1000ml三角瓶內，。25-27℃下靜置培養25天，最後可得到4-4.3克／200ml培養液的雲芝菌絲生成量。 3.以上述方法製備大量菌絲後，取用100克菌絲粉末加入3公升蒸餾水，在98℃下攪拌加熱3小時，之後將熱水抽出液和菌絲殘餘物分離，再以同樣的抽出方法，以蒸餾水或0.1N碳酸鈉溶液浸煮菌絲殘餘物。 4.收集2次浸煮後得到的熱水抽出液進行濃縮，加入硫酸銨至飽和，以鹽析方式，將小分子量物質去除。 5.產生的沈澱物溶於水中，使用纖維素膜(cellulose membrane) 進行透析以去除鹽分。 6.反覆進行飽和硫酸銨沈澱、透析等步驟2次，將透析後的溶液通過DEAE-纖維素管柱(cellulose column)，並以1N食鹽水溶液把吸附在管柱上的物質沖提(elute)出來。 7.沖提出的溶液再次進行飽和硫酸銨沈澱和透析的步驟，再將透析後的溶液以噴霧乾燥方式製成黃褐色的目標產物。 以上述方法精製而得的產品，分子量範圍0.8-