三株真菌次级代谢产物分析-药物化学专业论文.docx

摘要本文以三株真菌为研究对象，其中两株为拟盘多毛孢属植物内生真菌，一株为植物病原菌，进行化学成分及生物活性研究。首先将三株真菌进行大量发酵，发酵产物用硅胶柱色谱，SephadexLH-60，SephadexLH-20凝胶，制备型薄层层析，HPLC等方法进行分离纯化，再结合现代波谱学方法1H-NMR，13C-NMR，HMBC，HSQC，1H-1HCOSY，NOESY，MS，IR等手段进行波谱解析，最后对部分化合物进行抗肿瘤，抗氧化活性测试。本实验共分离鉴定出29个化合物，其中4个为新化合物。从牛心果内生真菌Pestalotiopsiscalabae的液体发酵提取物中分离鉴定出12个化合物，其中2个为新化合物。通过1H-NMR，13C-NMR等波谱信息，并查阅相应文献确定化合物结构分别为：ergosta-4,6,8(14)，22-tetraen-3-one(2-1-1),(?)-(4S,8S)-foedanolide(2-1-2)，(+)-(4R,8R)-foedanolide(2-1-3)，4-羟基苯甲酸(2-1-4)，1’,2’-epoxy-3’,4’-didehydropenicillide(2-1-5)，丁二酸(2-1-6)，pestalotin(2-1-7)，4-(2-hydroxypentyl)-4-methoxy-3,7-dioxabicyclo[4.1.0]heptan-2-one(2-1-8)，hydroxypestalotin(2-1-9)，2,6-bis[(1R)-1-hydroxyisobutyl]-1H,5H-pyrrolo[2,3-b]indole-4,8-dione(2-1-10)，6-(1,4-dihydroxypentyl)-4-ethoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(2-1-11)，6-(1,3-dihydroxypropyl)-4-methoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(2-1-12)。其中化合物2-1-11，2-1-12为新化合物。从番石榴内生真菌Pestalotiopsiscalvispora的固体发酵粗提物中分离鉴定11个化合物，其中2个为新化合物。所得化合物分别为：ergosta-7,22-dien-3β,5α,6α-triol(cerevisterol)(2-2-10)，3β-羟基-麦角甾-5,7,22-三烯(2-2-1)，3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯(2-2-8)，对羟基苯乙基乙酸酯(2-2-2)，对羟基苯甲醛(2-2-3)，邻-羟基苯乙醇(2-2-6)，对羟基苯乙醇(2-2-7)，对羟基苯甲醇(2-2-9)，4-羟基-4-甲基四氢-2H-吡喃-2-酮(2-2-11)，4,6-dihydroxy-3,8-dimethyl-2H-chromen-2-one(2-2-4)，4-hydroxy-3-(1-hydroxyethyl)-5,7-dimethylbenzofuran-2(3H)-one(2-2-5)。其中2-2-4,2-2-5为新化合物。从大丽轮枝菌VerticilliumdahliaeKleb.的液体发酵提取物中分离鉴定出6个化合物，均为该种中首次发现。化合物分别为：吲哚-3-甲醛(2-3-1)，4-羟基苯甲酸(2-3-2)，1H-吲唑(2-3-3)，2-(2-羟基苯基)乙酸(2-3-4)，2-(1H-吲哚-3-基)乙酸(2-3-5)，对甲基苯甲酸(2-3-6)。采用MTT法对部分化合物进行抗肿瘤活性测试显示，化合物2-1-10对Hela细胞株有抑制活性，IC50与阳性药物顺铂相比稍弱。2-1-7在48h后，对Hela有抑制活性。2-2-2,2-2-3对Hela细胞系抑制活性活性随时间递增，经结构修饰或可提高活性。化合物2-2-7,2-2-8活性不佳。化合物2-1-10对U251细胞株有抑制活性，IC50与阳性药物顺铂相比稍弱。2-1-7、2-1-9在72h时，对U251有抑制活性。采用DPPH法测试部分化合物抗氧化活性，阳性对照BHA随浓度变化抑制率有明显变化，自由基最高清除率可达82.6%。化合物2-3-4，2-1-5，2-3-1有抗氧化活性，其中2-3-4较强，最高可达50.0%，但低于BHA。关键词拟盘多毛孢属大丽轮枝菌化学成分结构鉴定生物活性AbstractThreestainoffungi,twoofwhichareendophyticfungiPestalotiopsis,oneisphytopathogenicfungi,arestudiedinthispaperfortheirmetaboliteschemicalconstituentsandbioactivity.Three