关节炎巴布剂.doc

关节炎巴布剂定性鉴别研究 摘要：目的 建立关节炎巴布剂的薄层定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法, 以石油醚 （30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂, 鉴别大黄; 以甲苯：乙酸乙酯：甲醇：异丙醇：水（12:6:4:3:0.6）为展开剂, 鉴别黄柏;结果 大黄、黄柏的定性鉴别方法简便、准确、重现性好；供试品色谱中斑点的位置及颜色与对照品总体上一致。结论 该方法操作简便，专属性强，重现性好，结果准确可靠，可作为关节炎巴布剂的薄层定性鉴别方法，用于控制其质量。 关键词：关节炎巴布剂剂；定性鉴别；薄层色谱法 关节炎巴布剂由大黄、黄柏、补骨脂、红花、骨碎补、黄芪、等药物组成，具有补益肝肾、活血化瘀、舒筋通络、祛风止痛、祛寒逐湿的功效，广泛地用于骨伤科疾病，治疗跌打肿痛、扭挫伤、风湿痹痛、神经痛、风湿关节痛、肩颈痛、肌肉痛等症疗效确切。为了更好地控制其质量，保证临床疗效，本实验采用TLC 法对其进行了定性鉴别研究，建立了制剂中大黄、黄柏的薄层定性鉴别方法。 1 仪器与试剂 HHS双列二孔电热恒温水浴锅（山东医疗器械厂）；KS-150E超声震荡仪（宁波海曙科生超声设备有限公司）；JA电子分析天平（MINQIAO）；ＷＦＨ三用紫外分光仪（上海精密实验设备有限公司）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；大黄、黄柏对照药材或对照品（中国药品生物制品检定所）；关节炎巴布剂由制剂室提供；其余试剂均为分析纯。 2 鉴别 2.1 大黄的TLC 鉴别 取本品6 贴，除去盖衬，剪碎，置圆底烧瓶中，加20%硫酸-氯仿（1:5）混合液100ml，加热回流30min，加入100ml 1%氢氧化钠水溶液萃取，加盐酸（1mol/L）调pH 至2～3，用三氯甲烷萃取2 次，每次20ml，合并三氯甲烷，蒸干，残渣加甲醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。用同样方法，提取3个批次。另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。再取大黄对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；再取除大黄外的其余成分按制备工艺制成缺大黄的阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述供试品及阴性对照溶液10μl，对照药材及对照品溶液各5μl，，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以石油醚 （30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显4个相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液无干扰。（见图1）。 1 2 3 4 5 6 1～3 供试品 4 大黄对照药材 5大黄素 6阴性对照品 图1 2.2 黄柏的TLC 鉴别[1] 取本品3贴，除去盖衬，剪碎，置圆底烧瓶中，加乙醇30ml，加热回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml 使溶解，加浓氨水调pH 至8～9，用三氯甲烷萃取2 次，每次20ml，合并三氯甲烷，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。用同样方法，提取3个批次。另取黄柏对照药材0.1g，加乙醇10ml，加热回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣甲醇5ml 使溶解，作为对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml 含0.25mg 的溶液，作为对照品溶液。再取除黄柏外的其余成分按制备工艺制成缺黄柏的阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述供试品及阴性对照溶液10μl，对照药材及对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲醇：异丙醇：水（12:6:4:3:0.6）[2]为展开剂，置氨蒸汽预饱和的展开缸内展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液无干扰。（见图2） 1 2 3 4 5 6 1～3 供试品 4 黄柏对照药材 5 盐酸小檗碱 6阴性对照品 图2 3 讨论 3.1巴布剂作为在国内目前属一个新兴的剂型,所用的药物载体（膏剂基质），大多为化学合成的物质（高分子材料），其本身不参与药理作用，仅仅是一个药物的载体而已。其优点有： 粘度适宜，适于反复揭贴；? 药物吸收率高，临床效果好；? 对皮肤无刺激性，无过敏现象且透气性极佳； 含水量高达60%，更利于药物的透皮吸收，生物利用度高；? 揭贴无残留，不污。 3.2上述薄层色谱鉴别试验中，在大黄、黄柏两种供试品的提取过程中都需要进一步提纯，这样可以令供试品的粘度降低，便于点板和展开。 3.3 处方中含有补骨脂、大黄、黄柏、木瓜等等。补骨脂具有治疗腰膝冷痛的作用；大黄则有治疗跌打损伤、瘀血肿痛风湿痹痛、筋脉拘挛、脚气肿痛3.4采用薄层色谱法对关节炎巴布剂中的大