采用蛋白质芯片技术进行乳腺癌细胞因子筛选及il8在乳腺癌侵袭和血管生成中作用的研究-protein chip technology was used to screen cytokines in breast cancer and study the role of il8 in breast cancer invasion and angiogenesis.docxVIP

林颢博士论文：采用蛋白质芯片技术进行乳腺癌细胞因子筛选及Ⅱ，8在乳腺癌侵袭和血管生成中作用的研究中文摘要孵育1．5小时，不同细胞培养上清液根据收集的细胞的蛋白质浓度进行标化，不够lml的以5％BSA／TBS加至Iml。经过0．1％Tween20／TBS(3次，每次5分钟)和TBS(2次，每次5分钟)震荡洗涤后，去除未与苍片膜结台的细胞因子。再将芯片膜与生物素标记的多种细胞因子抗体混合液孵育1．5小时。经过震荡洗涤，最后将芯片膜与2．5pg／ml链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶孵育1小时。同样的洗涤条件去除未结合的HRP—Streptavidin。最后采用EnhancedChemiluminescencesystem化学发光法检测信号。同时，通过ELISA验证细胞因子抗体芯片实验所得的相对信号强度。第二部分IL一8在乳腺癌细胞侵袭、血管生成和增殖中的作用乳腺癌细胞体外侵袭能力的测定在重建基底膜的12孔板Transwell小室中进行。Matrigel30u1用不含血清的DMEM培养基1：1稀释(总量60u1)，加入Transwell小室的多孔聚碳酯膜上表面(膜孔径12．0um)，室温下通风橱中干燥1小时。将不同细胞株的细胞用PBS洗3次，消化后重悬于含10％FCS的DMEM培养基中，取4×105／ml细胞0．5ml加入至上室，1．5ml10％FCS的DMEM培养基加入下室。37(2、5％