第4次细胞分离与纯化和细胞系、细胞克隆060209.ppt

B.葡聚糖凝胶G-10过柱法 4.基于不同黏附特性的细胞分离方法 葡聚糖（sephadex）是葡萄糖的聚合物，在水中膨胀时可形成凝胶。葡聚糖G-10凝胶具有极小的微孔，常用于分离生物大分子，但也可用来分离细胞。 其分离细胞的原理是：利用细胞的黏附特性，使之黏附于葡聚糖凝胶从而将异质性细胞悬液中的具黏附能力的细胞去除。 C.羰基铁粉法 用羰基铁粉处理，能有效地去除异质性细胞悬液中具有黏附能力的细胞。 该法的基本原理是：把铁粉加入异质性细胞悬液中后，具有黏附活性的细胞将黏附于铁粒子，在器皿外用磁铁将铁粒子连同黏附其上的细胞吸至底部，收获细胞悬液，即为去除了黏附细胞的细胞制剂。 此法通常用于去除免疫细胞悬液中的单核／巨噬细胞。在此情况下，单核／巨噬细胞可吞噬铁粒子，这一特性也有助于将其清除。 4.基于不同黏附特性的细胞分离方法 D.尼龙毛分离法 尼龙毛(nylon wool)就是聚酰胺纤维。应用尼龙毛柱可从混合白细胞悬液中获得富含T淋巴细胞的制剂。 其基本原理是：B淋巴细胞和单核／巨噬细胞易黏附于尼龙毛表面，当白细胞悬液通过尼龙毛柱时，B淋巴细胞、浆细胞及单核／巨噬细胞将黏附于柱上，而无黏附能力的T细胞则通过柱子，收集流出的细胞即获T淋巴细胞。 此法主要用于从淋巴细胞中分离T淋巴细胞和B淋巴细胞或从白细胞或单个核细胞中纯化或去除T淋巴细胞。 5.利用细胞表面标志分