毕业设计论文）-紫丁香ISSR-PCR反应体系优化研究.docVIP

PAGE Liaoning Normal University（2011届）本科生毕业论文(设计)题 目： 紫丁香ISSR-PCR反应体系优化研究学 院： 生命科学学院专 业： 生物技术班级序号： 3班5号学 号： 学生姓名： 指导教师： 2015年5月第第 2 -页目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc418335565 前言 PAGEREF _Toc418335565 \h - 3 - HYPERLINK \l _Toc418335566 1.材料与方法 PAGEREF _Toc418335566 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335567 1.1材料 PAGEREF _Toc418335567 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335568 1.1.1试验材料 PAGEREF _Toc418335568 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335569 1.1.2主要试剂与仪器 PAGEREF _Toc418335569 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335570 1.2方法 PAGEREF _Toc418335570 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335571 1.2.1紫丁香基因组DNA的提取及检测 PAGEREF _Toc418335571 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc418335572 1.2.2 ISSR-PCR反应体系 PAGEREF _Toc418335572 \h - 6 - HYPERLINK \l _Toc418335573 1.2.3 ISSR-PCR反应体系退火温度的确定 PAGEREF _Toc418335573 \h - 7 - HYPERLINK \l _Toc418335575 1.2.4 ISSR-PCR反应程序 PAGEREF _Toc418335575 \h - 7 - HYPERLINK \l _Toc418335576 1.2.5 ISSR-PCR产物的电泳检测 PAGEREF _Toc418335576 \h - 7 - HYPERLINK \l _Toc418335577 2.结果 PAGEREF _Toc418335577 \h - 8 - HYPERLINK \l _Toc418335578 2.1 DNA模板浓度对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335578 \h - 8 - HYPERLINK \l _Toc418335579 2.2 TaqDNA聚合酶量对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335579 \h - 9 - HYPERLINK \l _Toc418335580 2.3 Mg2+浓度对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335580 \h - 9 - HYPERLINK \l _Toc418335581 2.4退火温度对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335581 \h - 10 - HYPERLINK \l _Toc418335582 2.5dNTPs浓度对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335582 \h - 11 - HYPERLINK \l _Toc418335583 2.6引物浓度对ISSR扩增效果的影响 PAGEREF _Toc418335583 \h - 12 - HYPERLINK \l _Toc418335584 3.分析与讨论 PAGEREF _Toc418335584 \h - 13 - HYPERLINK \l _Toc418335585 致 谢 PAGEREF _Toc418335585 \h - 15 - HYPERLINK \l _Toc418335586 参考文献 PAGEREF _Toc418335586 \h - 16 -紫丁香ISSR-PCR反应体系优化研究中文摘要:以紫丁香为试验材料,采用改良CTAB法提取基因组DNA,为了获得最佳的紫丁香ISSR-PCR反应体系,本试验利用梯度试验对ISSR-PCR扩增结果有影响的dNTPs的浓度、TaqDNA聚合酶量、Mg2+浓度、退火温度、模板浓度、引物浓度共6个因子进行摸索和优化。确定了25μL时优化的反应体系:10×PCR buffer（不含Mg2+）2.5μL、模板DNA10ng/μL、dNTPs0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.0U、引物0.6mmol/L(筛选自UBC s