淫羊藿女贞子配伍对维甲酸致大鼠骨质疏松模型影响研究.docVIP

淫羊藿女贞子配伍对维甲酸致大鼠骨质疏松模型影响研究 　　[摘要] 目的：探讨淫羊藿女贞子配伍对维甲酸致大鼠骨质疏松模型的影响。方法：3月龄雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常对照组、模型对照组、淫羊藿组、女贞子组、淫羊藿女贞子配伍组、雷洛昔芬组。维甲酸灌胃2周建立大鼠骨质疏松模型，造模同时各给药组分别灌服相应药物治疗3周。测定血清钙（Ca）、磷（P）、碱性磷酸酶（AKP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）含量，并观察股骨病理形态学变化。结果：模型组较对照组血清Ca，P含量显著降低，AKP，StrACP活性均显著升高，股骨头区骨小梁数目减少，窄小稀疏，断裂，呈典型的骨质疏松样改变；与模型组比较，各给药组均可显著提高血清Ca，P含量，下调血清AKP，StrACP水平，且骨小梁数目增加，变宽，密集交织呈网状，以配伍组作用最为显著。结论：淫羊藿女贞子可有效纠正骨代谢异常，改善骨组织病理状态，从而发挥抗骨质疏松作用，其中以二药配伍应用效果更佳。 　　[关键词]骨质疏松；维甲酸；淫羊藿/女贞子；实验研究骨质疏松症（osteoporosis，OP）是以骨量减少和骨组织纤维结构退化，继而引起骨骼脆性和骨折危险性增加为特征的系统性骨骼疾病，目前已跃居为世界常见病发病率的第7位，其严重性已受到严密关注[1]，而中医药着重调动内因，整体调节，在防治本病方面具有较大的优势。OP属于中医“骨痿”、“骨痹”范畴，中医学认为OP的发生首先当责之于肾虚精亏，多采用补肾填精壮骨之法[2]。药对淫羊藿女贞子是名老中医徐辉光教授积30余年临床之经验而精选创制，临床4∶3配伍作为支气管患者缓解期用药，课题组前期研究结果证实[3]，平补肾中阴阳立法之淫羊藿女贞子配伍对大鼠哮喘模型激素干预治疗导致的骨代谢异常有良好的保护作用，提示二者配伍可能具有拮抗OP的作用。大量研究已证实单味淫羊藿及淫羊藿和/或女贞子相关复方在防治OP方面的显著效果[4-5]，但尚未见二药配伍防治OP的报道。本实验通过比较研究淫羊藿、女贞子单用及配伍对维甲酸致大鼠骨质疏松模型的影响，探讨二药配伍对骨代谢异常及骨组织病理状态的改善作用，为防治OP的进一步研究提供实验依据。 　　1材料 　　1.1动物 清洁级健康雄性Wistar大鼠60只，3月龄，体重（250±20） g，由北京维通利华实验动物技术股份有限公司提供，合格证号SCXK（京）2012-0001。 　　1.2试剂与药品 维甲酸（北京贝丽莱斯生物化学有限公司，批号120701）；羧甲基纤维素钠300～800 mPa?S（CP）（国药集团化学试剂有限公司，批号；中药材制淫羊藿（批、酒女贞子（批号1205042）均购于北京同仁堂药店；盐酸雷洛昔芬片（易维特）：规格为每片重0.258 5 g，相当于以C28H27NO4S?HCl计60 mg（礼来苏州制药有限公司，批号L02576）；氨基甲酸乙酯（乌拉坦）（天津市光复精细化工研究所，批；AKP，StrACP，Ca，P测定试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号分别2012092520120921）。 　　1.3仪器 UV-1700紫外分光光度计（日本岛津公司）；Biofuge 15R低温生物离心机（Heraeus SEPATECH公司）；CP224C电子分析天平[0.000 1 g，奥豪斯仪器（上海）有限公司制造]；NIS-Elements BR 3.2图像分析软件；尼康（Nikon）ECLIPSE 80i 生物显微镜（北京锐驰恒业仪器科技有限公司）；莱卡2016型切片机（上海莱卡仪器有限公司）。 　　2方法 　　2.1分组 按随机数字表法分为6组，即正常对照组、模型对照组、淫羊藿组、女贞子组、淫羊藿女贞子配伍组（简称配伍组）、雷洛昔芬组（阳性对照组），每组10只。自由饮水、摄食。 　　2.2造模及给药 除对照组外，其余各组大鼠用0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）配成的维甲酸混悬液按70 mg?kg-1灌胃，对照组大鼠以0.5%CMC-Na灌胃，连续造模2周。在造模的同时，各组动物灌胃给予相应的药物或生理盐水，共计3周。①淫羊藿组：淫羊藿煎剂9.5 g?kg-1体重灌胃，每日1次；②女贞子组：女贞子煎剂9.5 g?kg-1体重灌胃，每日1次；③淫羊藿女贞子组：淫羊藿女贞子（4∶3）煎剂9.5 g?kg-1体重灌胃，每日1次；④雷洛昔芬组：雷洛昔芬片6.25 mg?kg-1体重灌胃，每日1次；⑤对照组、模型组：灌服与用药组等体积的生理盐水。 　　2.3取材及检测 大鼠禁食16 h后麻醉，腹主动脉取血，离心取血清，用于血清AKP，StrACP，Ca，P的检测，按照试剂盒说明书，均采用比色法检测。完整