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山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 选修1 生物技术实践 基础自主梳理 高频考点突破 命题视角剖析 即时达标训练 山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 选修1 生物技术实践 基础自主梳理 高频考点突破 命题视角剖析 即时达标训练 返回 专题2　微生物的培养与应用 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对_________的不同需求，配制出的供其_________的营养基质。 2．营养构成 一般都含有水、______、氮源、_______、生长因子，还需满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及O2的要求。 营养物质 生长繁殖 碳源 无机盐 3．培养基的类型、用途 二、无菌技术 1．消毒 (1)特点：使用较为_____的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和______)。 (2)常用方法：煮沸消毒法、____________、物理或化学药剂消毒法。 2．灭菌 (1)特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外____________包括芽孢和孢子。 (2)常用方法：灼烧灭菌、干热灭菌、___________灭菌。 温和 孢子 巴氏消毒法 所有的微生物 高压蒸汽 培养基、培养皿、接种环 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 杀死生物体内所有的微生物，包括芽孢和孢子 强烈的理化因素 灭菌 操作者的双手、工作台等 煮沸消毒法、巴氏消毒法化学药剂（酒精等）紫外线消毒等 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 较为温和的物理或化学方法 消毒 适用范围 常用方法 结果 条件 方法 消毒与灭菌的比较 三、微生物培养的基本技术 1．配制培养基： 称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。 2．灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。 3．接种 (1)接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。 (2)接种工具：包括________、涂布器。 (3)接种方法：平板划线法、_____________法。 (4)注意事项：整个操作过程都要在__________旁完成。 4．培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养。 接种环 稀释涂布平板 酒精灯火焰 四、菌种保藏 1．临时保藏 (1)操作： 采用固体斜面培养基，菌落长成后，放入_____冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次新的培养基。 (2)缺点：保存时间不长，菌种易被____或产生变异. 2．长期保存法：甘油管藏法，放在－20 ℃下保存. 五、土壤中分解尿素细菌的分离与计数 1．菌种筛选 (1)培养基：__________。 (2)特点：________是唯一氮源。 4 ℃ 污染 选择培养基 尿素 2.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①方法：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。 ②缺点：不能区分死菌和活菌。 ?(2)间接计数法(活菌计数法) ①方法：一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式：每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M，C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V表示涂布平板时所用稀释液的体积mL，M表示稀释倍数。 3．设置对照 主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 六、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 1．土壤取样：选择富含纤维素的环境。 2．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 (1)制备鉴别培养基：主要碳源CMC—Na。 (2)刚果红染色法 ①先培养_______，再加入刚果红进行颜色反应。 ②________时加入刚果红。 3．进一步鉴定 (1)为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。 (2)测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定。 微生物 倒平板 葡萄糖 即时应用 (2011年湘潭高三第一次模拟)关于灭菌和消毒的理解不正确的是(　　) A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质是相同的 C．接种环用灼烧法灭菌 D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等 解析：选B。灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。 菌株筛选原理的比较 土壤中分解尿素的细菌 分解纤维素的微生物 常用选择培养基进行筛选，既提供有利于目的菌株生长的条件，如营养、温度、pH等，同时抑制其他微生物的生长 刚果红染色法，即在含有纤维素的培养基中，加入刚果红时，刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后，该复合物