肠杆菌科(一)第4版课件.pptVIP

南昌大学第二附属医院检验科 胡龙华： 主任技师、硕士生导师 2011年9月12日 第八章 肠杆菌科 第一节 概述 肠杆菌科是一类存在人和动物肠道内的一大群形态、生物学性状相似的无芽胞的革兰阴性杆菌。广泛分布在植物、土壤、水以及人和动物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的重要成员。  一、分类与命名 　　二、临床意义 主要引起泌尿道和肠道的感染。 也可致化脓性疾病、肺炎、菌血症等。 占临床分离菌总数的50％和Ｇ-总数的80％, 将近50％的败血症,70％以上的泌尿道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科细菌引起的。 二、临床意义 1. 人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外感染，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染;且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌可引起烈性传染病——鼠疫。 　　二、临床意义 2. 人类肠道感染 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶 尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠 道感染、食物中毒、旅行者腹泻及肠 热症等。 三、生物学特性 肠杆菌科的共同特性 形态染色相似:均为革兰阴性杆菌、无芽胞、多有鞭毛、有致病性的菌株多数有菌毛,有或无荚膜。 培养特性相同：营养要求不高，普通营养琼脂生长良好；兼性厌氧,液体培养基中呈混浊生长。 生化反应活跃：非致病菌除变形杆菌属外，均分解乳糖产酸，而致病菌均不发酵乳糖，发酵葡萄糖（产酸或产酸产气），触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原阳性。 抗原构造复杂。 抵抗力弱。 易变异。 形态染色 肠杆菌科细菌的抗原 四、微生物检验 （二）标本采集 1．肠外标本：采自不同的感染部位。 2. 肠道标本：脓血和粘液部分进行粪便培养，培养应在2小时内进行以利于志贺菌等的检出，如不能及时培养应将沾有标本的棉拭子插入运送培养基或甘油缓冲盐水中。 （三）标本直接检查 　显微镜检查，革兰阴性杆菌。肠杆菌科多数细菌的形态及染色性无鉴别意义。 四、分离培养鉴定（1） １、分离培养 １）肠外标本： 标本(无菌）→增菌培养→接种血平板、中国兰（麦康凯或伊红美兰）。 标本（其它） →血平板、中国兰等。 ２）肠道标本→接种中国兰（麦康凯、伊红美兰）、SS琼脂。 四、分离培养鉴定（2） ２、鉴定 　鉴定肠杆菌科细菌时应按照科、属、种的顺序进行。 　其原则是： 　　定科：采用葡萄糖发酵及氧化酶试验与弧菌 　　　　　科和非发酵菌加以鉴别； 　　分群：用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐或VP试验； 　　属、种鉴定：选择生化反应和血清学试验进行属 　　　　　　　种鉴定。 肠杆菌科的分群 苯丙氨酸脱氨酶阳性和VP试验阴性： 变形杆菌属、摩根菌属及普罗威登斯菌属。 苯丙氨酸脱氨酶阴性和VP试验阳性： 克雷伯菌属、沙雷菌属、肠杆菌属、哈夫尼亚菌属、泛菌属和耶尔森菌属。 苯丙氨酸脱氨酶阴性和VP试验阴性： 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属和爱德华菌属。 四、分离培养鉴定方法（3） 常规生化鉴定：此为临床微生物实验室最常用的方法。 鉴定试剂盒：方便，可靠、稳定，鉴定能力强。 全自动或半自动微生分析仪。 血清学鉴定：以血清学为主，结合形态学和生化反应作 出全面判断。 分子生物学鉴定：利用分子生物学技术可将肠杆菌科细菌鉴定至科、属、种和血清型，甚至可区分致病菌株和非致病菌株，如现在可用PCR技术检测伤寒沙门菌引起的感染或检测大肠埃希菌肠毒素基因。 噬菌体鉴定：该方法常用于流行病学调查和传染源追踪。 （五）抗菌药物敏感试验 目前肠杆菌科细菌耐药性的问题日趋严重。除有些细菌对某些抗生素有天然耐药性外，更主要的是由于抗生素广泛使用造成选择压力而形成的获得性耐药，既有由质粒介导的超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)又有由染色体或质粒介导的AmpC酶而产生的对β－内酰胺抗生素的耐药性。己出现了耐多种抗生素的多重耐药菌株，因此临床医生必须根据抗菌药物敏感试验的结果选用合适的抗生素。 第二节　埃希菌属 一、分 类 埃希菌属包括5个种： 大肠埃希菌是肠道中G-杆菌的主要 成员， 常引起肠内外的感染，是腹 泻和泌尿道感染的主要病原菌。 二、临床意义 （一）致病因素： 均以菌毛粘附肠粘膜上皮，表面抗原具有抗吞噬及抵抗抗体和补体的作用，内毒素、肠毒素为主要致病物质。因此，肠杆菌引起的疾病有