第八篇 高效液相色谱法.pptVIP

六 尺寸排阻(凝胶)色谱法 排阻色谱分离示意图 相对分子质量差别 大于10％的化合物 才可以分离 1 分离原理 体积排除色谱的分离机理 2 固定相 是一种经过交联而具有立体网状结构的多聚体，其中含有大量液体（一般是水），柔软而富于弹性。 凝胶 3 流动相 不采用改变流动相组成的 方法控制分离度 凝胶色谱概述 分离基于分子在溶液中的体积大小 洗脱次序：大分子先被洗脱 流动相不参与分离，只起溶剂作用 分离效率低 色谱行为容易预测 分离方法的选择 七、亲和色谱(AC) （Affinity chromatograph） 原理：利用生物大分子和 固定相表面存在的某种特 异性亲和力，进行选择性 分离。 先在载体表面键合上一 种具有一般反应性能的所 谓间隔臂(环氧、联胺等)，再连接上配基(酶、抗原 等)，这种固载化的配基将只能和具有亲和力特性吸 附的生物大分子作用而被保留。改变淋洗液后洗脱。 第三节 液相色谱的固定相与流动相 一、液相色谱固定相 1. 液-液分配及离子对分离固定相 （1）全多孔型担体 由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采用100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多 见；现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料； （2）表面多孔型担体 （薄壳型微珠担体）30～40μm的玻 璃微球，表面附着一层厚度为1～2μm