十六-PAS和Feulgen染色.PPT

十六-PAS和Feulgen染色

组织化学实验 实验十五、小鼠肝糖原染色——PAS反应 实验十六、小鼠肝/肠核酸染色——Feulgen反应 实验目的 1.了解PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)的基本原理,掌握PAS染色法的技术方法及其应用。 2.了解孚尔根染色法的基本原理,掌握孚尔根染色法的技术方法及其应用。 小鼠肝糖原染色——PAS反应 糖原是由多个葡萄糖组成的带分枝的大分子多糖,形状为大小不等的颗粒,遇碘则变褐色,易溶于水。 动物细胞内贮存的多糖,完全由葡萄糖组成。在动物体内以肝脏和骨骼肌中储量最丰富,与淀粉在植物中的作用相当。 肝糖原分解主要维持血糖浓度,肌糖原分解为肌肉自身收缩供给能量。 利用强氧化剂使多糖产生游离的醛基,醛基和Schiff试剂结合,形成紫红色的化合物。因此在有多糖的部位,就会呈现除紫红色阳性反应。 PAS (Periodic Acid Schiff ) 反应的基本原理 将0.5g碱性品红置入三角烧瓶内沸腾的蒸馏水中,时时摇动玻璃瓶,煮沸5min使之充分溶解,冷却至50℃时过滤,加入10ml 1M HCl,冷至25℃时,加入0.5g偏重亚硫酸钠(Na2S2O3)或无水亚硫酸(NaHSO3),在室温冷暗处至少放置24h(有时需2~3天),使其颜色退至淡黄色,密封瓶口,藏于暗处,最好保存于4℃冰箱中(可保存数月或更长时间)。在使用前加入0.5g

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