第11章rna的生物合成12制药.pptVIP

四、核 酶 具有酶促活性的RNA称为核酶。 核酶(ribozyme) 四膜虫rRNA内含子的二级结构 四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 5′-端核苷酸序列 核酶研究的意义 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶。 茎环结构使转录终止的机理： 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote 第三节 真核生物的转录过程比原核复杂。二者的转录起始过程有较大区别，转录终止也不相同。 一、 真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶 真核生物具有3种不同的RNA聚合酶: RNA聚合酶Ⅰ（RNA PolⅠ） RNA聚合酶Ⅱ（RNA PolⅡ） RNA聚合酶Ⅲ（RNA Pol Ⅲ） 真核生物的RNA聚合酶 真核生物RNA聚合酶的结构比原核生物复杂，所有真核生物的RNA聚合酶都有两个不同的大亚基和十几个小亚基. RNA聚合酶Ⅱ由12个亚基组成，其最大的亚基称为RBP1。 RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列(consensus sequence)为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重复序列片段，称为羧基末端结构域(carboxyl-terminal domain, CTD)。 CTD对于维持细胞的活性是必需的。 二、转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与 （一）转录起始前的上游区段具有启动子核心序列 不同物种、不同细胞或不同的基因，转录起始点上游可以有不同的DNA序列，但这些序列都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。 一个典型的真核生物基因上游序列: 5’ 3’ 调控序列 TATA盒 Inr YYAN YY T A -30 +1 TATAAA 顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件(upstream promoter elements)或promoter-proximal elements)等近端调控元件和增强子(enhancer)等远隔序列。 起始点上游多数有共同的TATA序列，称为Hognest盒或TATA盒(TATA box)。通常认为这就是启动子的核心序列。 许多RNA聚合酶II识别的启动子具有保守的共有序列：位于转录起始点附近的起始子(intiator，Inr) 。 启动子上游元件是位于TATA盒上游的DNA序列，多在转录起始点约-40～-100nt的位置，比较常见的是GC盒和CAAT盒。 增强子是能够结合特异基因调节蛋白， 促进邻近或远隔特定基因表达的DNA序列。 转录起始点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件(cis-acting element) AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 OCT-1 OCT-1：ATTTGCAT八聚体 （二） 转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ （三） 转录起始前复合物 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子，形成转录起始复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 PIC的形成 三 、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行 真核生物的转录终止，是和转录后修饰密切相关的。 真核生物mRNA有聚腺苷酸(poly A)尾巴结构，是转录后才加进去的。 转录不是在poly A的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。已发现，在读码框架的下游，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列。这些序列称为转录终止的修饰点。 真核生物的转录终止及加尾修饰 真核生物RNA的加工 Post-transcriptional Modification of Eukaryotic RNA 第四节 真核生物转录生成的RNA分子是初级RNA转录物(primary RNA transcript