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- 2018-07-23 发布于江西
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课题3 酵母细胞的固定化学习目标1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。2.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。学习重点:制备固定化酵母细胞。学习难点:制备固定化酵母细胞。学习过程(一)课题背景酶:优点:催化效率高,低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。 实际问题:对环境条件敏感,易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本;反应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。 设想: 固定化酶:优点 实际问题:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成 都是通过一系列的酶促反应才能得到的 设想: 固定化细胞:优点 (二)、固定化酶的应用实例高果糖浆是指 能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种 上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的 。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与 接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。(三)、固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用 或 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括 、 和 法。一般来说,酶更适合采用 和 法固定,而细胞多采用 法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被 或 ,而个小的酶容易从 中漏出。包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 包埋在不溶于水的 中。常用的载体有 、 、 、 和 等。〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么?〖思考2〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固定( );若将蛋白质变成氨基酸,应当固定( )。(四)、实验操作(1)制备固定化酵母细胞制备固定化酵母细胞需要的材料是 、 和 1.酵母菌的活化活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。2.配制物质的量尝试为0.05mol/L的Cacl2溶液3.配制海藻酸钠溶液加热溶化海藻酸钠时要注意: 4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合5.固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,并浸泡 (时间)。(2)用固定化酵母细胞发酵1.将固定好的酵母细胞用 冲洗2-3次。2.发酵时的温度就为 ,时间 。〖思考4〗加热溶化海藻酸钠时微火加热并不断搅拌的目的是什么?〖思考5〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞?〖思考6〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封?〖思考7〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的?〖思考8〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作码?(五)、结果分析与评价(一)观察凝胶珠的颜色和形状如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。(二)观察发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多 ,同时会闻到 。反馈练习1.使用固定化细胞的优点是( )A.能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应C.与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用2.酶的固定方法不包括
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