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生化实验-蛋白质的变性、凝固与沉淀反应性质
蛋白质的变性、凝固 及沉淀反应 生物化学与分子生物学教研室 实验一 验证关于蛋白质的相关理论 学会分析蛋白质的基本实验方法 讨论蛋白质分析在科研和临床工作中的意义 在某些物理和化学因素作用下,蛋白质理化性质的改变和生物学活性的丧失。 引起蛋白质变性的理化因素 加热 乙醇等有机溶剂 强酸、强碱 重金属盐 生物碱试剂 学习蛋白质变性的意义 消灭病原微生物 蛋白质制剂的保存 保护体内蛋白质 变性的可逆性 可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构可以恢复原状。 不可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构不能恢复原状。 一般轻度变性是可逆,过度变性是不可逆。 破坏蛋白质的水化层和电荷,使蛋白质从溶液中析出的现象 蛋白质沉淀是一种现象 疏水领域 颗粒表面水化膜 胶粒表面同种电荷 结构和性质都不变 适当条件下可重新溶解 是分离和纯化的基本方法 结构和性质都发生变化 沉淀不再溶解于水 变性蛋白易于沉淀 沉淀蛋白不一定变性 接近于等电点附近的蛋白质溶液加热,可使蛋白质发生凝固 不可逆变性状态 水/无机盐/尿素 水/无机盐/尿素/蛋白质 蛋白质变性凝固 加热醋酸法 变性、沉淀、凝固之间关系 变性属于蛋白质本质的变化,沉淀和凝固属于一种现象 变性不一定沉淀,变性蛋白质只在等电点附近才沉淀,沉淀的变性蛋白质也不一定凝固 注意事项 逐滴加入,仔细观察 酒精灯使用前注意酒精量的多少,加热时试管口不可对人,不用时熄灭 酒精灯加热时,要进行晃动,避免局部高温,引起试管炸裂 用过的枪头、滤纸放于污物缸 苦味酸属危险试剂 用过的试管仔细清洗 老年痴呆者脑血管中产生大量难溶性蛋白的诱因 蛋白质变性、沉淀和凝固可在细胞、组织的哪些生命过程中出现?试举例与哪些疾病(或病变)的发生相关?
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