菌种培养操作题.docVIP

1透明质酸菌种染色方法?用吸管吸取菌液一滴滴在载玻片中央，加一滴藩红染色液染色三分钟，在酒精灯上固定干燥后，用洗瓶洗去染色液后，晾干，显微镜下观察。2 斜面的制作（1）按斜面配方称取各种药品用纯水溶解后，调PH至7.0，加入琼脂，在电炉上加热至沸（沸腾三次）分装于试管（装液量约到试管高度的1/4处），塞上棉塞，用报纸包扎好灭菌。（2）0．1MPA，121℃，20min（3）灭菌完毕待压力自然下降至零，方可打开灭菌锅盖，严禁急速排气降压，以防培养基冲湿棉塞，灭菌后的斜面试管待冷却至45℃左右放置斜面，盖上无菌报纸，经无菌检查（空培养24h）后用报纸包扎好（报纸注明日期），放入冰箱备用。3种子的制作培养基的制作，按种子培养基配方称取药品用纯水溶解后，调PH至7.0，装液量按500ml三角瓶150ml，2000ml三角瓶装1000ml分装于三角瓶中，瓶口用纱布包扎，用报纸包扎好灭菌，并注上日期及培养基类型。在无菌条件下通过无菌操作将菌源接种于培养基中。将接种好的三角瓶放入37℃转速150r/min的摇床中培养12-16h。4菌种的分离纯化（试管稀释法）倒板：无菌操作条件下，将灭菌后冷却至60-70℃的培养基倒入培养皿内，每皿约25ml，水平放置，凝固后备用。吸取0.5ml菌悬液于无菌水管中做梯度稀释。用无菌吸管吸取菌悬液两滴于培养皿中，每个稀释梯度2-3板，首末梯度可做1板。用无菌刮刀将