溴甲酚绿法测定血清白蛋白(论文资料).pptVIP

实验五 溴甲酚绿法测定血清清蛋白 一、实验目的 掌握：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的基本原理和操作。 熟悉：血清清蛋白测定的临床意义。 了解：溴甲酚绿法测定血清清蛋白的特点和注意事项。 血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物，在波长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白的浓度成正比。 与同样处理的清蛋白标准比较，可求得血清中清蛋白含量。 三、试剂与器材 1. 0.5mol/L 琥珀酸缓冲贮存液 2. 10mmol/L BCG贮存液 3. 叠氮钠贮存液 4. 聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）贮存液 5. BCG试剂 6. 40g/L 清蛋白标准液 7. 分光光度计 　立刻混匀后，在波长630nm处用空白管调零，30s±3s内读取吸光度。 五、计算 　　　　　　　　　　 血清清蛋白(g/L)＝āu/ās×蛋白标准液浓度(g/L) = āu/ās×40 (g/L) 参考范围：正常人:35－55g/L 六、注意事项 1. BCG是一种pH指示剂，变色域为pH3.8（黄色）~5.4（蓝绿色），因此控制反应液的pH是本法测定的关键。 2. 时间必须控制准确。因为BCG不但与清蛋白呈色，而且与血清中多种蛋白质成分呈色，其中以a1-球