【医学课件】不明原因肺炎病例排查与人禽流感标本采集.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 上呼吸道标本：包括鼻拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、鼻洗液、咽漱液。 ?最佳采集时间为发病后3天内，一般不超过7天 下呼吸道标本：包括呼吸道吸取物、支气管灌洗液、胸水、肺组织活检标本。 ?下呼吸道标本最有利于禽流感病毒分离 尸检标本：主要包括肺、气管，条件允许下也可采集肝、肾、脾、心脏、脑、淋巴结等组织标本。每一采集部位分别使用不同消毒器械，以防交叉污染；每种组织应多部位取材，各部位应取20～50g，淋巴结取2个。 ?病人死亡后应尽早进行解剖，无菌采集 现场采样和要求 ? 血清标本：应尽量采集急性期、恢复期双份血清。急性期血样的采集，不能晚于发病后7天；恢复期血样在发病后第2、3、4周采集。如未能采集到急性期血样，仍应尽早采集第一份血样，并在间隔2～4周后采集第二份血样。采集量要求5ml，以空腹血为佳，建议使用真空采血管。 ?病例诊断需双份血清 其它标本：可在病例发病后的7天内采集粪便标本。 现场采样和要求 ? 标本 最佳采样时间 检测项目 血清 急性期和恢复期双份 抗体 血清 发病早期 SARS－N蛋白 咽漱液 粪便 尿液 发病早期 病毒核酸、 SARS－N蛋白 禽流感H抗原 病毒分离 1.核酸检测：包括 RT-PCR和Real-Time RT-PCR 2.抗原快速检测： ELISA法和金标法（包括A/B型特异性检测试剂和H5亚型特异性检测试剂） 本方法仅具参考价值，不作为诊断依据 3.病毒分离及鉴定：采用SPF鸡胚和MDCK细胞分离方法。病毒的鉴定采用血凝抑制试验、神经氨酸酶抑制试验和序列测定 4.血清学检测：包括血凝抑制试验（灭活抗原）和微量中和试验（活病毒）。 现场采样和要求 ? 对健康人群或病人密切接触者进行带菌调查时一般采鼻咽拭子(用一端弯成135°的消毒棉拭子)。采样时，让受检者尽量张开口，用压舌板将舌头轻轻压下，用前端略向上弯曲135°的无菌棉拭子探入口腔内悬臃垂后面的鼻咽孔部位。采集该部位的分泌物，直接接种到10%巧克力色双抗血琼脂平板上进行分离。 鼻咽拭子： 现场采样和要求 ? 插入干的拭子到鼻孔 伸入鼻咽部，停留片刻，缓慢旋转退出，另一个鼻孔使用另一个棉签，将尾部弃去，拧紧盖子。 拭子类型：聚丙烯纤维头的塑料拭子、棉签拭子 鼻咽拭子： 现场采样和要求 ? 最佳采集时间为发病后3天内，一般不超过7天，急性期内每天采集。用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，同样将棉签头浸入4-5 ml采样液的管中，尾部弃去，塞紧或盖好管盖。 口咽拭子： 现场采样和要求 ? 最好发病3天内，晨起后。 方法 先让患者咳嗽数声，用5ml采样液漱口，急性期内每天采集。漱时让患者头部微后仰，发噢声，让洗液在咽部转动，含漱几次后，用纸筒作漏斗接上病人吐出的漱口液入无菌广口试管中，塞上胶塞，立即置于冰壶冷藏送检。 漱口液： ?注意避免污染环境 现场采样和要求 ? 发病3天内，晨起后 方法 病人将痰液咳入无菌平皿中，然后用棉签刮取痰液放入含3ml采样液的螺口塑料管中。 痰液： 现场采样和要求 ? 鼻咽抽取物----发病早期 气管抽取物----发病各期 方法 将收集器头部插入鼻腔或气管，用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集器）。 抽取物： 现场采样和要求 ? 灌洗液： 呼吸道灌洗液－－ 肺部炎症时 方法 将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液涮洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集）。 现场采样和要求 ? 血清： 第一次于发病后7天内 第二次于发病14天（21天）后 方法 用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟，1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于2ml无菌螺口塑料管中，注意及时分离血清并分装。 ? 空腹采血 现场采样和要求 ? 眼拭子： 发病早期（1～5天）的急性结膜炎病人 方法 用灭菌棉拭子涂擦翻转的上、下睑结膜各一次以上，并拭取泪液立即投入装有病毒保存液的试管中贴好标签,填写《采样登记表》置低温(-20℃～70℃)冻存。 现场采样和要求 ? 尸检标本： 死亡后迅速采取 方法 每一采集部位分别使用不同消毒器械，以防