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- 2018-07-18 发布于山东
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临床医学专业-半薄超薄切片技术
半薄/超薄切片技术;背景:;一、超薄切片技术介绍;固定地好
渗透包埋地好
切地好
载网膜做地好
染地好;超薄切片主要步骤;1 取材;1.2 取材方法
材料放在洁净的韧性较大的纸上
滴上预冷的固定液
用刀片将组织切下并修小
用牙签或镊子将组织块移至盛有预冷的固定液的小瓶中。
植物材料的取材可以先切成薄片,经适当固定后再切成小方块继续固定。 ;2 固定 ;2.2 常用固定剂;(2)戊二醛 ( ?C5H8O2)--glutaraldehyde
※有效保存组织细微结构,对蛋白质的固定效果好;
※渗透力强,渗透速度快,较好的固定糖原、核蛋白、微管、内质网和细胞基质、有丝分裂的纺锤丝及胞饮小泡等;
※保存某些酶的活力,较好保存抗原,适于细胞化学研究;
※对组织和细胞的穿透力比四氧化锇强,均匀固定深度:0.5~1mm ,0-4℃可长时间固定(几周甚至1~2个月)不会使组织变脆,可用于远离实验室的取材;
▼缺点:不能保存脂肪,磷脂固定效果差,对细胞膜的显示较差,没有电子染色作用。 ;(3)甲醛-Formaldehyde
※渗透组织的能力比戊二醛强,对于致密组织(种子)固定作用好;
※细胞精细结构保存质量不如戊二醛,但酶活性的保存优于戊二醛;
▼缺点:不能较好的固定细胞基质,脱水后大部分细胞基质将丢失;
*常用多聚甲醛-戊二醛的混合固定液。;(4)高锰酸钾
※强
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