植物细胞工程与动物细胞工程的比较1.pptVIP

融合过程示意图 * 单克隆抗体的概念 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 抗体: 化学性质单一、特异性强 * 实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理：B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验材料：小白鼠 实验器材：培养皿、针筒等等。 实验过程：如下页 根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案: * 单克隆抗体制备过程 * 单克隆抗体的应用 主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高的优点。如；各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士，能识别“自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。 * 植物细胞工程与动物细胞工程的比较 植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础；动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动、植物细胞工程的原理和技术手段有相似之点，但也存在不同之处，现对两者的主要技术手段加以分析比较： * 一、植物细胞的组织培养与动物细胞培养1．过程 ⑴植物组织培养 再分化 激素、光 离体的植物器官、组织 或细胞 脱分化 营养物、激素 愈伤组织 根、芽 植物体 胚状体 人工种子 人造胚乳和种皮 发育 * 动物胚胎或幼龄动物器官、组织 ⑵动物细胞培养 剪碎、胰蛋白酶 单个细胞 动物血清、葡萄糖、氨 基酸、无机盐、维生素 细胞悬浮液  细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 …… 原代培养 传代培养  细胞株 细胞系 * 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 植物细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体或半固体培养基，包括矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物、植物激素等 液体培养基，包括无机盐、葡萄糖、维生素、氨基酸、动物血清等 培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 培养结果 植物体 细胞株、细胞系 培养目的 ①快速繁殖名贵花卉和果树 ②培养无病毒植株、转基因植物 ③大规模生产细胞产品如药物、食品添加剂、香料、色素等 ①生产蛋白质制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等 ②检测有毒物质 ③研究药理病理 ④移植治疗 相同点 ①都需要人工条件下的无菌操作，无菌培养 ②都需要适宜的温度、pH等条件 * 二、植物体细胞杂交与动物细胞融合（单克隆抗体制备） 1．过程 ⑴植物体细胞杂交： * ⑵动物细胞融合（单克隆抗体制备）： * 2．植物体细胞杂交与动物细胞融合（单克隆抗体制备）比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合（单克隆抗体制备） 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法除细胞壁（纤维素酶和果胶酶） 注射特定抗原免疫处理正常小鼠 促融方法 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 物理法、化学法与植物原生质体融合促融方法相同 生物法：灭活的病毒 过程 第一步：用酶解法制备原生质体 第二步：用物理法或化学法促使原生质体融合 第三步：杂种细胞的筛选与培养 第四步：杂种植株诱导和鉴定 第一步：正常小鼠免疫处理 第二步：用物理法、化学法或生物法促使动物细胞融合 第三步：杂交瘤细胞筛选与培养 第四步：单克隆抗体的提纯 意义和用途 ①克服远源杂交不亲合的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围 ②克服有性杂交的母系遗传，可获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传 ①制备单克隆抗体 ②诊断、治疗、预防疾病。例如： a.肿瘤定位诊断，放射性抗体→肿瘤 b.生物导弹治疗，抗体—抗癌药物→肿瘤 * 三、胚胎移植与核移植 1．哺乳动物的胚胎移植：指在体外完成受精作用和早期的胚胎发育，然后将早期的胚胎转移到母体的子宫发育。试管动物是指的体外受精和早期胚胎发育生物。试管牛的培育过程如下图所示： 2．核移植：核移植是动物克隆技术的基础。鲤鲫移核鱼的培育过程如下图所示： （兼有鲤鱼、鲫鱼特点，具有正常生殖能力） 鲤鱼：囊胚细胞核 鲫鱼：去核未受精卵 值得注意的是：克隆多莉羊是把来自高度分化的体细胞的核移植到去核的卵细胞中形成的重组细胞培育而来的； 动物 排卵 体外受精 胚胎 母牛子宫 试管牛 （激素处理） （激素处理） 重组细胞→鲤