基因转录及加工逆转录.docVIP

PAGE PAGE 12 第十三章 基 因 的 转 录、转 录 后 加 工 及 逆 转 录 转录 (transcription) XE 转录 (transcription) 是以DNA单链为模板，NTP为原料，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。与DNA的复制相比，有很多相同或相似之处，亦有其特点，它们之间的异同可简要示于表13-1 表13-1 转录与复制的异同 差 异 相 同 转录 复制 或相似 模板 基因的模板链转录 2股链均全复制 DNA 原料 NTP dNTP 核苷三磷酸 碱基配对 A-U，T-A；G-C A-T；G-C 遵从碱基配对原则 聚合酶 RNA聚合酶 DNA聚合酶 依赖DNA的聚合酶 产物 mRNA，tRNA，rRNA等 DNA 多核苷酸链 转录的模板是单链DNA，与复制的模板有较多的不同特点，引出了下列相关概念。转录过程只以基因组DNA中编码RNA（mRNA、tRNA、rRNA及小RNA）的区段为模板。把DNA分子中能转录出RNA的区段，称为结构基因（structure gene） XE 结构基因（structure gene） \y jie2gou4ji1yin1 。结构基因的双链中，仅有一股链作为模板转录成RNA，称为模板链(template strand) XE 模板链(template strand) ，也称作Watson（W）链(Watson strand) XE Watson链Watson strand) 、负（-）链(minus strand) XE 负（-）链(minus strand) 或反意义链(antisense strand) XE 反意义链(antisense strand) 。与模板链相对应的互补链，其编码区的碱基序列与mRNA的密码序列相同（仅T、U互换），称为编码链(coding strand) XE 编码链(coding strand) ，也称作Crick（C）链（Crick strand） XE Crick（C）链Crick strand 、正（+）链(plus strand) XE 正（+）链(plus strand) ，或有意义链(sense strand) XE 有意义链(sense strand) 。不同基因的模板链与编码链，在DNA分子上并不是固定在某一股链，这种现象称为不对称转录(asymmetric transcription) XE 不对称转录(asymmetric transcription) 。模板链在相同双链的不同单股时，由于转录方向都从5’→3’，表观上转录方向相反，如图13-1。 与DNA复制类似，转录过程在原核生物和真核生物中所需的酶和相关因子有所不同，转录过程及转录后的加工修饰亦有差异。下面的讨论中将分别叙述。 参 与 转 录 的 酶 转录酶（transcriptase） XE 转录酶（transcriptase） \y zhuan3lu4mei2 是依赖DNA的RNA聚合酶（DNA dependent RNA polymerase，DDRP）， XE 依赖DNA的RNA聚合酶（DNA dependent RNA polymerase，DDRP） \y yi1lai4de5ju4he2mei2 亦称为DNA指导的RNA聚合酶（DNA directed RNA polymerase） XE DNA指导的RNA聚合酶（DNA directed RNA polymerase） ，简称为RNA聚合酶（RNA pol） XE RNA聚合酶（RNA pol） 。它以DNA为模板催化RNA的合成。 原核生物和真核生物的转录酶，均能在模板链的转录起始部位，催化2个游离的NTP形成磷酸二酯键而引发转录的起始，如图13-2所示。因此，转录的起始不需引物，这也是转录与复制在起始阶段的一大区别。 一、 原核生物的RNA聚合酶 细菌中只发现一种RNA聚合酶，能催化mRNA，tRNA和rRNA等的合成，研究得比较清楚的是大肠杆菌（E coli）的RNA聚合酶。 （一） 大肠杆菌RNA聚合酶的组成 大肠杆菌RNA聚合酶的分子量约